慶大霉素?fù)p傷后前庭上皮細(xì)胞增殖凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究.pdf

1、目的:觀察慢性慶大霉素中毒后豚鼠前庭上皮的損傷和修復(fù)過程,探討前庭毛細(xì)胞凋亡和再生的關(guān)系;研究慶大霉素慢性損傷后豚鼠前庭終器蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)Cα、Cβ亞型的表達(dá)和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性的變化及其βⅠ、βⅡ、γ亞型的表達(dá),探討PKA、PKC與前庭損傷修復(fù)的關(guān)系;方法:1.采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記(terminal deoxynucleoti

2、dyl transferase-mediated deoxyuridine tripho-sphate nick end labeling,TUNEL)法觀察前庭感覺上皮細(xì)胞的凋亡,采用5-溴脫氧尿核苷(bromodeoxyuridine,Brdu)免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察前庭上皮的修復(fù)過程.2.采用免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察橢圓囊斑、球囊斑和壺腹嵴PKACα、Cβ亞型的表達(dá)變化及分布特點(diǎn).3.采用免疫細(xì)胞化學(xué)法觀察橢圓囊斑、球囊斑和壺腹嵴PKCβ<

3、,Ⅰ,Ⅱ>、γ亞型的表達(dá)變化及分布特點(diǎn):應(yīng)用<'32>γ-P示蹤檢測前庭終器PKC活性的變化. 結(jié)論: 1.慢性慶大霉素耳中毒后豚鼠前庭上皮細(xì)胞凋亡增加,凋亡與增殖伴隨存在,前庭上皮細(xì)胞的凋亡可能是其增殖的觸發(fā)因素.增殖過程表現(xiàn)為支持細(xì)胞增生向毛細(xì)胞增生移行的趨勢,支持細(xì)胞增殖并轉(zhuǎn)化成毛細(xì)胞可能是前庭上皮細(xì)胞損傷修復(fù)機(jī)理之一. 2.慶大霉素慢性中毒后豚鼠前庭感覺上皮PKCβ<,Ⅰ>、γ亞型表達(dá)及PKC活牲均發(fā)生變化,且不同亞型抗原分布不