PPARγ激動(dòng)劑對(duì)肥胖小鼠血清脂聯(lián)素、尿蛋白排泄及腎臟病理改變的作用.pdf

1、目的：
　　肥胖已經(jīng)成為世界范圍的流行病，肥胖的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)。肥胖及代謝綜合征因胰島素抵抗和慢性炎癥引起復(fù)雜的代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病、高血壓、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病和其他臟器功能損害，其中腎臟損害越來(lái)越受到重視。本研究以肥胖相關(guān)性腎病(obesity-related glomerulopathy，ORG)的發(fā)病機(jī)制和過(guò)氧化物酶體增殖物活化受體γ(peroxisome proliferatoractivated re

2、ceptorγ，PPARγ)激動(dòng)劑的作用機(jī)制為理論基礎(chǔ)，評(píng)價(jià)PPARγ激動(dòng)劑對(duì)肥胖小鼠血清脂聯(lián)素(adiponectin，ADP)、尿微量白蛋白(microalbumin，mALB)排泄及腎臟病理的影響，探討PPARγ激動(dòng)劑防治ORG的意義。
　　方法：
　　選取8周齡雄性O(shè)B小鼠16只和其同系C57小鼠8只。將OB小鼠按體質(zhì)量分層隨機(jī)分為兩組：模型組(M組)和治療組(T組)，高脂飼料喂養(yǎng)。C57小鼠作為對(duì)照組(C組)，普通

3、飼料喂養(yǎng)。各組小鼠1次/天灌胃，T組小鼠以吡格列酮12.5 mg·kg-1·d-1灌胃，C組和M組小鼠以等量蒸餾水灌胃。每周測(cè)定體質(zhì)量一次，根據(jù)體質(zhì)量調(diào)整給藥劑量，連續(xù)12周。于實(shí)驗(yàn)前后測(cè)定小鼠血糖，血清 ADP及24小時(shí)尿mALB。12周末處死小鼠，摘取雙側(cè)腎臟，稱(chēng)量雙腎濕重。光鏡下HE染色觀(guān)察小鼠腎臟病理變化，測(cè)量腎小球直徑，免疫組化方法測(cè)定腎小球足細(xì)胞胞質(zhì)緊密連接蛋白-1(zonula occludens-1，ZO-1)的表達(dá)水平

4、及以足細(xì)胞特異性標(biāo)志蛋白(Wilms tumor1，WT1)標(biāo)記的足細(xì)胞數(shù)。比較三組小鼠之間血清ADP、尿mALB、雙腎濕重、腎小球直徑、足細(xì)胞ZO-1表達(dá)水平及足細(xì)胞數(shù)的差異，并將實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)小鼠血清ADP、尿mALB和體質(zhì)量、血糖、雙腎濕重、腎小球直徑、ZO-1表達(dá)水平、足細(xì)胞數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.M組和T組小鼠體質(zhì)量

5、均超過(guò)C組小鼠平均體質(zhì)量的20％，即達(dá)到小鼠肥胖標(biāo)準(zhǔn)。三組小鼠血糖均小于16.7mmol/L，即排除小鼠糖尿病。
　　2.實(shí)驗(yàn)前三組小鼠血清ADP無(wú)顯著差異(P>0.05)；M組和T組小鼠尿mALB均高于C組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)后T組小鼠血清ADP高于C組和M組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)；M組小鼠尿mALB仍高于C組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，T組小鼠尿mALB明顯低于

6、M組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，與C組小鼠比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。此外，M組小鼠實(shí)驗(yàn)后血清ADP低于實(shí)驗(yàn)前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；T組小鼠實(shí)驗(yàn)后尿mALB低于實(shí)驗(yàn)前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　3.M組小鼠雙腎濕重高于C組小鼠，T組小鼠雙腎濕重高于C組小鼠，而低于M組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。M組小鼠腎小球體積明顯增大，部分伴有局灶節(jié)段性腎小球硬化，T組小鼠腎小球體積未見(jiàn)增

7、大，無(wú)腎小球硬化表現(xiàn)。M組小鼠腎小球直徑大于C組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，T組小鼠腎小球直徑小于M組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)，與C組小鼠比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。M組小鼠ZO-1表達(dá)水平、足細(xì)胞數(shù)均低于C組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)，T組小鼠ZO-1表達(dá)水平、足細(xì)胞數(shù)均高于M組小鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與C組小鼠比較均無(wú)顯著差異(P>0.05)。
　　4.相

8、關(guān)性分析顯示：小鼠血清ADP和尿mALB、腎小球直徑呈負(fù)相關(guān)(r=-0.538，P<0.01；r=-0.411，P<0.05)，和ZO-1表達(dá)水平、WT1標(biāo)記的足細(xì)胞百分?jǐn)?shù)呈正相關(guān)(r=0.421，P<0.05；r=0.409，P<0.05)，而和體質(zhì)量、血糖、雙腎濕重?zé)o明顯相關(guān)性(P>0.05)。小鼠尿mALB和雙腎濕重、腎小球直徑呈正相關(guān)(r=0.457，P<0.05；r=0.529，P<0.01)，和血清ADP、ZO-1表達(dá)水平呈

9、負(fù)相關(guān)(r=-0.538，P<0.01；r=-0.437，P<0.05)，而和體質(zhì)量、血糖、WT1標(biāo)記的足細(xì)胞百分?jǐn)?shù)無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.本研究所用的動(dòng)物模型為自發(fā)突變OB小鼠，肥胖伴有糖代謝異常，但未達(dá)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，是理想的研究人類(lèi)肥胖的動(dòng)物模型。
　　2.肥胖小鼠血清ADP下降，尿mALB升高，且兩者呈負(fù)相關(guān)；腎小球肥大，部分伴有局灶節(jié)段性腎小球硬化，腎小球足細(xì)胞ZO-1的表達(dá)水平及