小腸粘膜下層材料的制備及相關(guān)實驗研究.pdf

1、研究目的：探索建立前置處理-超聲結(jié)合化學(xué)處理的方法制備小腸粘膜下層，并依次從組織學(xué)、化學(xué)試劑殘留量測定、細(xì)胞毒性、組織相容性、組織修復(fù)功能驗證等方面評價制備的小腸粘膜下層生物學(xué)性能。
　　研究方法：采用超聲生物技術(shù)，結(jié)合胰酶、SDS試劑，處理經(jīng)過機(jī)械刮除小腸漿膜、肌層、粘膜層等前置處理的小腸粘膜下層；將樣品用固定劑固定后，在光學(xué)顯微鏡和真空掃描電子顯微鏡下觀察并比較脫細(xì)胞處理前后小腸粘膜下層膠原結(jié)構(gòu)；采用亞甲基藍(lán)-分光光度法檢測小

2、腸粘膜下層材料殘留的SDS含量；體外培養(yǎng)L929細(xì)胞，制備材料浸提液，采用MTT法計算細(xì)胞相對增殖率，判定材料的細(xì)胞毒性；大鼠皮下埋入材料，通過觀察局部反應(yīng)評價制備的SIS材料的組織相容性；建立大鼠腹壁缺損模型，以脫細(xì)胞真皮基質(zhì)為對照，比較兩組材料在大體觀察、粘連評分、組織學(xué)觀察方面差異，評價小腸粘膜下層對腹壁缺損的修復(fù)能力。
　　研究結(jié)果：光學(xué)顯微鏡和真空掃描電子顯微鏡下觀察，制備的SIS材料無細(xì)胞殘留成分，基質(zhì)成分未發(fā)生明顯變

3、化；采用亞甲基藍(lán)-分光光度法檢測材料清洗液中SDS含量輕微，對人體無副作用；細(xì)胞毒性實驗顯示，制備的SIS材料細(xì)胞毒性評價為1級，符合體內(nèi)植入性醫(yī)用材料要求；皮下埋入實驗顯示，術(shù)后8周制備的SIS材料基本上降解完畢，膠原纖維結(jié)構(gòu)不可見，幾乎全部被機(jī)體組織包裹、吸收，新生成的纖維結(jié)構(gòu)纖細(xì)、松散、平型排列。小腸粘膜下層修復(fù)組織缺損術(shù)后24周觀察，材料膠原纖維全都被機(jī)體組織包裹、吸收，被平行或交錯分布的纖維結(jié)締組織替代，形成了成熟的肉芽組織，