超聲聯(lián)合一氧化氮微泡促進(jìn)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞遷移及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證明,超聲聯(lián)合微泡可增效骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢能力,一氧化氮(NO)在其中起著重要的作用。
　　 目的：討論超聲聯(lián)合NO微泡對(duì)干細(xì)胞遷移能力的影響及其可能機(jī)制,以探求NO微泡對(duì)MSC歸巢的促進(jìn)作用。
　　 方法：超聲聯(lián)合微泡作用于不同濃度比的左旋精氨酸(L-Arg)雙氧水混合物,硝酸還原法檢測(cè)不同超聲輻射強(qiáng)度下非酶化NO的生成量；體外分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),隨機(jī)分為超聲聯(lián)合NO微泡組

2、(Ul+NOMb組),超聲聯(lián)合普通微泡組(Ul+Mb組),單純超聲組(Ul組),微泡組(Mb組),空白對(duì)照組(CON組),其中Ul+NOMb組根據(jù)微泡所占體積百分比再分為三個(gè)濃度組,分別是1:70,1:50,1:20三個(gè)組,干預(yù)后采用MTT比色法檢測(cè)MSCs增殖,流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期；Transwell小室檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,RT-PCR檢測(cè)遷移移相關(guān)的SDF-1受體CXCR4基因的表達(dá)。
　　 結(jié)果：(1)Ul+Mb

3、組的非酶化NO生成量較CON組、Ul組及Mb組高(P＜0.01),UlMb組中10:1濃度組非酶化NO生成量最高(P＜0.01),1.5W／cm2的NO生成量最高(P＜0.01)；(2)對(duì)細(xì)胞增殖的影響,Ul+NOMb組中低濃度組(1:50與1:70),與對(duì)照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),1:20濃度組抑制細(xì)胞增殖(P＜0.01)；(3)對(duì)細(xì)胞凋亡與細(xì)胞周期的影響,Ul+NOMb組中1:70濃度組,與對(duì)照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

4、(P＞0.05),Ul+NOMb組中1:50與1:70濃度組誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡(P＜0.01),1:50濃度組較1:70濃度組對(duì)細(xì)胞凋亡的影響小(P＜0.01),與UlMb組無明顯差異(P＞0.05)；(4)Ul+NOMb組作用后的MSCs遷移能力較其他各組強(qiáng),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01),其CXCR4基因表達(dá)同樣增強(qiáng),較其他各組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：超聲聯(lián)合微泡可以增效非酶化一氧化氮的生成,L-Arg與雙氧水