白蟻菌圃對BGC-823細胞及PD果蠅的影響.pdf

1、白蟻巢,在生物學上稱為白蟻菌圃,是由白蟻唾液及其他分泌物與植物碎屑粘結(jié)構(gòu)筑而成,是天然的固體培養(yǎng)基,其富含多種生物活性物質(zhì)。研究發(fā)現(xiàn)其含有人體所需的脯氨酸、酪氨酸、天門冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、蘇氨酸、賴氨酸、亮氨酸等18種氨基酸和多種維生素,并富含鐵、鈣、鋅、硒、黃酮等10多種微量元素,并含有抑制腫瘤細胞的物質(zhì)----抗炎肽。其藥用功效在《本草綱目》就有記載,民間用其治療如肝炎,風濕性關節(jié)炎,胃潰瘍及疔瘡腫毒等有較好的療效。在現(xiàn)代醫(yī)學上

2、的應用也非常廣泛,主要用于治療炎癥,但對于腫瘤及帕金森氏病(PD)的防治作用研究尚未報導。
　　 目的：研究白蟻菌圃的提取液在抑制腫瘤細胞生長、抗氧化,以及在改善帕金森氏病的行為障礙和延長壽命方面的作用。
　　 方法：⑴細胞活性檢測(MTT法)檢測白蟻菌圃水提取液對人胃上皮細胞株(GES-1)及人胃癌細胞株(BGC-823)增殖的影響,同時倒置顯微鏡下觀察形態(tài)變化,用臺盼藍染色觀察細胞并細胞計數(shù)計算細胞的存活率。⑵流式細

3、胞術檢測白蟻菌圃水提取液對人胃癌細胞株(BGC-823)的細胞凋亡的影響。⑶采用熒光定量PCR法檢測p53基因表達變化,探討p53基因與白蟻菌圃水提液對BGC-823增殖影響的相關性。⑷采用H2O2誘導人神經(jīng)瘤母細胞株(SH-SY5Y)氧化損傷,建立細胞氧化損傷的模型,通過MTT法以及測定細胞培養(yǎng)基的過氧化物酶(SOD)等指標,分析白蟻菌圃的抗氧化作用。⑸通過監(jiān)測過表達α-突觸核蛋白(α-synuclein)的轉(zhuǎn)基因帕金森氏病(PD)果

4、蠅的攀爬能力和壽命,分析白蟻菌圃抗PD的作用。⑹蘇木精-伊紅(HE)染色觀察PD果蠅腦組織的病理改變。
　　 結(jié)果：①白蟻菌圃可以促進人胃上皮細胞株(GES-1)的生長。②白蟻菌圃可以抑制人胃癌細胞株(BGC-823)的增殖,白蟻菌圃作用24 h后細胞數(shù)目減少,細胞變圓、變小,皺縮,細胞核漿變少,核固縮,細胞質(zhì)濃縮。細胞增殖抑制率達18-71％,具有濃度依賴性。③熒光定量PCR結(jié)果顯示,不同濃度白蟻菌圃作用于BGC-823細胞后

5、p53基因表達上調(diào),有劑量依賴性,50及100mg／mL的提取液效果極顯著(P<0.01),12.5及25mg／mL有上調(diào)(P<0.05),6.25mg／mL無明顯差異。④MTT法檢測發(fā)現(xiàn),預先給予或同時加入白蟻菌圃均能夠?qū)笻2O2誘導的SH-SY5Y細胞氧化損傷,并且白蟻菌圃可以抑制H2O2引起的抗氧化酶SOD、GSH活性降低及MDA的含量明顯增加(P<0.05)。⑤與對照組相比,PD果蠅的攀爬能力隨著年齡增長逐漸降低,用含有白蟻菌