ATRA對人胃腺癌BGC-823細(xì)胞中腫瘤相關(guān)蛋白p62的影響.pdf

1、p62是與編碼胰島素樣生長因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)的mRNA結(jié)合的一種腫瘤相關(guān)抗原,采用肝癌病人血清篩選T24(人類膀胱癌細(xì)胞株)cDNA基因表達文庫分離得到.在本論文中,首先通過流式細(xì)胞儀、電鏡和MTT法等多種實驗方法研究全反式視黃酸(ATRA)對人胃腺癌BGC-823細(xì)胞的影響,發(fā)現(xiàn)ATRA對BGC-823細(xì)胞有兩種不同的生長抑制作用,1.0μM濃度的ATRA誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞的分化,而50μM濃度的ATRA誘導(dǎo)BGC-823細(xì)胞的

2、凋亡.通過激光共聚焦顯微鏡對BGC-823細(xì)胞的免疫細(xì)胞化學(xué)分析觀察到p62定位于細(xì)胞漿中,這一結(jié)果進一步通過蛋白免疫印跡和免疫電鏡技術(shù)得到證實.有趣的是,雖然1.0μM濃度ATRA處理的BGC-823細(xì)胞中p62蛋白的表達和定位未發(fā)生改變,但當(dāng)我們用50μM濃度的ATRA處理BGC-823細(xì)胞5天后,p62蛋白的表達和定位發(fā)生了明顯的改變,表現(xiàn)為在細(xì)胞中的表達發(fā)生了顯著減少,而且發(fā)生了細(xì)胞核轉(zhuǎn)位,運用電鏡免疫細(xì)胞化學(xué)方法可以看到,核內(nèi)

3、p62似乎與IGF-ⅡmRNA結(jié)合,正在參與IGF-ⅡmRNA的轉(zhuǎn)錄后水平上的調(diào)控.由此提示p62的表達和分布與腫瘤細(xì)胞的凋亡發(fā)生可能有密切關(guān)系.另外,利用雙向電泳和生物質(zhì)譜技術(shù),對人胃腺癌BGC-823細(xì)胞中全細(xì)胞和細(xì)胞核組分中差異蛋白的研究發(fā)現(xiàn):全細(xì)胞中,用1.0和50μM濃度ATRA處理的BGC-823細(xì)胞中共同出現(xiàn)3種新蛋白,另有1種原有蛋白消失;在細(xì)胞核組分中,50μM濃度ATRA處理的細(xì)胞中出現(xiàn)6種新蛋白,另有4種原有蛋白消