蝙蝠葛酚性堿對泌尿系統(tǒng)腫瘤作用的實驗研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學博士學位論文蝙蝠葛酚性堿對泌尿系統(tǒng)腫瘤作用的實驗研究姓名：李銘申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：蔡文清20060401中文摘要1采用三步法對北豆根醇提物進行初步純化，提純北豆根有效成分PAMD。通過薄層板顯色觀測PAMD主要含有的生物堿成分。對PA。MD通過柱層析進一步分離純化，，得到純品生物堿晶體，應用薄層層析、電噴霧質(zhì)譜以及紫外分光光度計進行成分鑒定。2用MTT法分析將其有效成分PA№及其純品Dau作用于膀胱癌T2

2、4細胞株、腎癌細胞株786O、前列腺癌PC3細胞株及腎癌和膀胱癌原代培養(yǎng)細胞，觀察抑瘤效果，計算藥物的半數(shù)抑制濃度(IC50)。結(jié)果：1PAMD的主要成分是為Dau和DS，分子量分別為624KD及610KD。2本實驗顯示，Dau及即山D均能對不同的泌尿系統(tǒng)主要的腫瘤有體外顯著的增殖抑制作用。最低的敏感藥物濃度多在375弘咖l，抑制率隨藥物濃度及作用時間而增加。Dau對T24、786O及PC3腫瘤細胞株增殖作用IC50分別為51lg／ml

3、、58pg／ml及81pg／瑚，而鼢山∞對三組的IC50分別為133“∥ml、166“咖l、192“咖l。Dau對各組細胞的增殖抑制強度高于鼢山∞組，在IC50對應的濃度上，PAMD組是Dau的253倍，說明Dau是始ⅣD中起作用的有效成分之一。按照判定標準，本樣品在體外對腫瘤細胞有殺傷作用。并且從IC50分析，T24、786O及PC3腫瘤細胞株對Dau和P舳的IC50依次遞增，即對藥物的敏感性依次下降。3Dau對原代細胞腎癌和膀胱癌細

4、胞也有不同程度的抑制作用，但抑制率較相應的腫瘤細胞株降低，IC50在375pg／ml到60p咖l以上不等，差異較細胞株組為大。在有效劑量內(nèi)(IC50lO鷴／m1)，ll例中5例對藥物敏感。結(jié)論：北豆根的有效成分是W山回，最終提純品為Dau和蝙蝠葛蘇林堿(dauris01iIle，DS)。P觸ⅥD和Dau對多種泌尿系統(tǒng)常見的腫瘤細胞株有很強的體外增殖抑制作用，且呈濃度和時間依賴性，說明此類生物堿具有廣譜的抗腫瘤作用；T。24、786一O及