中國水仙揮發(fā)性成分及影響因素分析.pdf

1、本研究以中國水仙為主要試材，采用不同的測(cè)試條件分析了水仙花、葉片、組培苗揮發(fā)性成分的組成和變化，以及中國水仙干花精油和中國水仙干葉精油成分。研究了赤霉素對(duì)芳樟醇合成的影響，游離氨基酸、游離脂肪酸、可溶性糖的變化和揮發(fā)性物質(zhì)的關(guān)系，探討了β-葡萄糖苷酶和醇?；D(zhuǎn)移酶對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)的影響。本文還分離了中國水仙花游離態(tài)和鍵合態(tài)揮發(fā)性成分，并對(duì)兩者進(jìn)行了比較。關(guān)于中國水仙揮發(fā)性成分對(duì)人體健康的影響，本文也有所涉及。因?yàn)榇减；D(zhuǎn)移酶、芳樟醇合成酶分

2、別與酯類合成、芳樟醇合成有關(guān)，最后，本研究試圖對(duì)這兩種酶的基因進(jìn)行了克隆。主要研究結(jié)果如下：
　　1.用65μmPDMS/DVB萃取頭、50/30μmDVB/CAR/PDMS萃取頭、75μmCAR/PDMS萃取頭、100μmPDMS萃取頭在相同的外部條件下萃取了中國水仙的揮發(fā)性成分。各種萃取頭所吸附的揮發(fā)性成分有所差異，但基本都能萃取到了 E-羅勒烯、Z-羅勒烯、芳樟醇、乙酸苯甲酯、乙酸苯乙酯等主要成分。
　　2.在不同溫度

3、、采后不同天數(shù)、不同培養(yǎng)條件下，以及中國水仙花揮發(fā)性成分早、中、晚的日變化實(shí)驗(yàn)中，雖然所測(cè)成分種類和含量有一定差異，但主要成分都是羅勒烯、芳樟醇、乙酸苯甲酯、乙酸苯乙酯等。中國水仙的兩個(gè)主要品種金盞銀臺(tái)和玉玲瓏的揮發(fā)性成分類似，也包括羅勒烯、芳樟醇、乙酸苯甲酯、乙酸苯乙酯等。
　　3.中國水仙葉片中主要揮發(fā)性成分是Z-乙酸-3-己烯酯、E-羅勒烯、乙酸苯甲酯、Z-丁酸-3-己烯酯、乙酸苯丙酯等。
　　4.中國水仙干花精油主要

4、成分是棕櫚酸和亞油酸，中國水仙干葉精油主要成分是棕櫚酸、植物醇、豆蔻酸、苯乙醛等。
　　5.在中國水仙鱗莖再生組培培養(yǎng)基中添加30mg/L、50mg/L、70mg/L濃度的赤霉素，以研究赤霉素對(duì)組培苗中芳樟醇合成的影響，結(jié)果顯示三個(gè)濃度與對(duì)照組相比，均未檢測(cè)到芳樟醇。
　　6.中國水仙花開放過程中苯丙氨酸的含量變化基本和主要酯類揮發(fā)性成分的變化呈正相關(guān)。油酸可能在初花期和盛花期用于合成揮發(fā)性物質(zhì)；亞油酸含量從花蕾期到初花期是

5、下降的，可能在此階段通過一系列降解反應(yīng)生成揮發(fā)性物質(zhì)。葡萄糖含量從花蕾、初花、盛花逐漸上升，到盛花期達(dá)到最高，然后開始下降，有可能是從花蕾期到盛花期，中國水仙內(nèi)源β-葡萄糖苷酶的活性逐漸升高，催化糖苷鍵的水解斷裂，釋放出葡萄糖， 導(dǎo)致葡萄糖含量升高，風(fēng)味物質(zhì)也逐漸增多。
　　7.中國水仙內(nèi)源β-葡萄糖苷酶、醇?；D(zhuǎn)移酶活性與酯類物質(zhì)和芳樟醇的含量呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。外源β-葡萄糖苷酶能水解糖苷鍵，釋放出與糖苷鍵結(jié)合的揮發(fā)性

6、物質(zhì)，如芳樟醇等。
　　8.利用Amberlite XAD-2樹脂柱分離了中國水仙盛花粉末中的游離態(tài)和鍵合態(tài)揮發(fā)性成分，發(fā)現(xiàn)游離態(tài)成分比鍵合態(tài)成分多。用β-葡萄糖苷酶酶解鍵合態(tài)組分，發(fā)現(xiàn)酶解后鍵合態(tài)中出現(xiàn)了葡萄糖，而酶解前沒有；果糖含量也比酶解前高；表明β-葡萄糖苷酶確實(shí)能水解糖苷鍵，使之生成單糖，并釋放出與糖苷鍵結(jié)合的揮發(fā)性物質(zhì)。但酶解后鍵合態(tài)中未出現(xiàn)芳樟醇，且基本沒有與游離態(tài)中相同的成分，也沒有出現(xiàn)大幅增加的成分。
　　

7、9.在布置一定中國水仙花數(shù)量的房間里測(cè)試了中國水仙花香氣成分對(duì)人體血壓、心率和呼吸頻率的影響。青年組在聞香一小時(shí)，測(cè)得血壓下降最大，而中老年組聞香兩小時(shí)，測(cè)定血壓下降最大。這可能是由于青年人肺功能好，聞香時(shí)用力深呼吸,芳香化合物刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的生物活性物質(zhì)，使得心率變慢，血壓下降，有效降低了心肌耗氧量。中老年人由于肺功能差，聞香時(shí)主要靠增加呼吸頻率，導(dǎo)致心率有所增加，但差異無顯著性。中國水仙花香能有助于降低人體血壓。
　　10.

8、醇?；D(zhuǎn)移酶和芳樟醇合成酶分別是合成酯類和芳樟醇的關(guān)鍵酶。本研究嘗試克隆醇?；D(zhuǎn)移酶基因（AAT）和芳樟醇合成酶基因（LIS），得到的AAT克隆片段與文獻(xiàn)中報(bào)道的AAT cDNA片段大小接近，但經(jīng)過序列分析后，發(fā)現(xiàn)與已知的AAT基因沒有相似性，不能確定所克隆片段是否就是AAT cDNA片段。所克隆的LIS片段經(jīng)過序列分析后，發(fā)現(xiàn)與GenBank中已知的LIS基因相似性很低，但其氨基酸序列中含有LIS基因的保守區(qū)RR和DDXXD，有待于克