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1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文外源野生型P16基因轉(zhuǎn)染對(duì)膀胱癌細(xì)胞周期影響的初步研究姓名：黎玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：楊恬20030501第三軍醫(yī)大學(xué)碩學(xué)位論文APrimaryStudyoftheEffectontheCellCycleofExogenousWildTypeP16GeneTransfectedBladderCancerCellAbstractCellcyclecontrolplaysakeyroleinth
2、egrowthofnormalmammalianceilsOneofthefundamentalabnormalitiesinhumantumorsisdysregulatedcellcyclecontr01ItisgenerallyacceptedthatactiveCdk4一CyclinD1complexeshelpcellstopassthroughtheRpoint，apointofneturn，afterwhichcellsb
3、ecomecommittedtoanewroundofreplicationAccumulatedevidencesindicatethatCdk4isthe‘primarysensor’fordrivingcellsthroughtheRpointanditiswidelyknownthatP16INK4acanarrestcellsinGIButhowcantheexpressionofexogenonsP16INK4geneaff
4、ecttheactivityofCdk4CyclinD1remains|王鞋clea羲InthisstudytheeffectofexogenouswildtypeP16geneoncancercellgrowthwasobservedandwealsoexaminedtheexpressionofP16geneandtheexpressionchangesofcellcycleregulatorygenes—Cdk4，CyclinD1
5、andRbinhumanbladdercancerceUsAlltheseelucidatetheinhibitioneffectofPl6geneonthecancercellcyclecontr01Methods：TheplasmidpcDNA3containingthewildtypep16geneandneogenewasusedinthetransfectionexperimentAfterwardthetransfectio
6、n，normalculturemediumwithadditional800ug／rraG418wasusedfor12daystoselectthetransfectedcellsFlowcytometry(FCM)wasperformedtoanalyzetheceltcycledistributionTheexpressionofseveralproteinsinvolvedincellcyclecontrolincludingP
7、16，Cdk4，CyclinDIandRbwasdetectedwithimmunocytochemistryfICC)。AndthetranscriptionofthefourgeneswasanalyzedwithRTPCRmethodResults：ThecellgrowthanalysisrevealedthattheproliferationofP16genetransfectedcancercellswasinhibited
8、afterthetransfectionofexogenouswildP16geneTheimmunocytochemicalresultsindicatedthatCdk4expressedintensivelyinthenucleiofE／，andtheexpressionofCyclinD1andRbwaspositivewhilethestainforP16antibodywasfaint；afterthetransfectio
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