阿霉素致大鼠心衰模型心肌細(xì)胞外基質(zhì)與組織蛋白酶D的變化及藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的：研究大鼠心衰模型心肌細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)重塑的分子機(jī)制，探討組織蛋白酶D(CatD)的作用以及卡維地洛與依那普利保護(hù)心臟機(jī)制。 方法： 雄性SD大鼠44只，重250±20g，隨機(jī)分為4組：①對(duì)照組(Control)，n=8；②阿霉素組(ADR)， n=12；③阿霉素+卡維地洛組(ADR+CVD)，n=12；④阿霉素+依那普利組(ADR+ENP)，n=12。正常組給予腹腔注射等體積生理鹽水，每周1次，共6周。第2～4

2、組均給予腹腔注射ADR，ADR用生理鹽水稀釋成2mg/ml溶液后按3mg/kg經(jīng)腹腔注射，每周1次，共6次。同時(shí)第3組給予卡維地洛10 mg/(kg·d)灌胃。第4組給予依那普利10 mg/(kg·d)灌胃。實(shí)驗(yàn)過程中，定期觀察大鼠的精神狀態(tài)、活動(dòng)、毛色、進(jìn)食、腹水、體重等大體情況。治療6周后測(cè)量血流動(dòng)力學(xué)及心功能并終止實(shí)驗(yàn)，心臟標(biāo)本經(jīng)HE、苦味酸一天狼猩紅染色(Sirus-red)，計(jì)算膠原容積分?jǐn)?shù)；免疫組織化學(xué)標(biāo)記左室內(nèi)心肌纖連蛋白

3、(FN)、層粘連蛋白(LN)和CatD；原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡；逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測(cè)定CatD轉(zhuǎn)錄水平。 結(jié)果： 1．與Control組相比，ADR組大鼠血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)明顯惡化?？ňS地洛組和依那普利組與ADR組相比，左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dt<,max>)和左室內(nèi)壓最大下降速率(-dp/dt<,max>)明顯提高，左室舒張末壓(LVEDP)顯著降低，左室收縮壓(LVSP)顯

4、著升高(P<0.05)。 2．ADR組與Control組相比，左室舒張末內(nèi)徑(LVDd)和收縮期末內(nèi)徑(LVDs)顯著擴(kuò)大(P<0.01)，左室射血分?jǐn)?shù)(EF)及短軸縮短率(FS)顯著降低(P<0.01)?？ňS地洛和依那普利能明顯改善這些異常。 3．ADR組病理結(jié)果顯示心肌細(xì)胞空泡變性、肌細(xì)胞溶解、肌纖維斷裂以及問質(zhì)水腫； 卡維地洛組和依那普利組病變較輕。 4．與ADR組相比，卡維地洛組和依那普利組大鼠左

5、室膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)顯著降低(P<0.05)。 5．ADR組左室FN、LN的積分光密度(IOD)均顯著高于Corltrol組(P<0.01)；卡維地洛組和依那普利組均顯著減少。 6．與對(duì)照組比較，ADR組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯(AI)升高；卡維地洛組和依那普利組細(xì)胞凋亡指數(shù)低于ADR組。 7．ADR組心肌CatD的平均光密度顯著高于Control組(P<0.01)，而卡維地洛組CatD的表達(dá)量低于ADR組(P<

6、0.05)。ADR組心肌CatD的轉(zhuǎn)錄水平明顯高于Coiltrol組(P<0.01)，而卡維地洛組的CatD的mRNA水平低于ADR組(P<0.05)。 結(jié)論： 1．腹腔注射ADR能成功的建立大鼠慢性心力衰竭模型，心衰模型均發(fā)生了血流動(dòng)力學(xué)紊亂和心臟重塑。 2．心衰時(shí)CatD的表達(dá)上調(diào)與心肌細(xì)胞凋亡和ECM重塑有關(guān)。 3．卡維地洛和依那普利均能抑制心肌細(xì)胞凋亡，減輕心臟重塑，改善心功能?？ňS地洛抑制心肌細(xì)