神經(jīng)干-祖細(xì)胞移植治療脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)大鼠的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　本實(shí)驗(yàn)首先構(gòu)建癥狀穩(wěn)定的脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)動(dòng)物模型。將3-乙酰吡啶(3-AP)、二氫駱駝蓬堿、維生素PP按照不同的時(shí)間依次注射到成年健康SD大鼠的腹腔，觀察大鼠的行為學(xué)改變和小腦、中腦和橋腦的形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠在接受注射的當(dāng)天即出現(xiàn)平衡障礙和步態(tài)異常，其后癥狀逐漸加重，1周達(dá)到高峰，而后癥狀輕度緩解，2周后癥狀穩(wěn)定。形態(tài)學(xué)顯示，下橄欖核神經(jīng)元喪失明顯，小腦皮層中浦肯野細(xì)胞(Purkinjecell)輕度減少，中腦、橋腦的神經(jīng)纖

2、維紊亂，神經(jīng)元內(nèi)尼氏小體崩解。通過該方法建立的動(dòng)物模型癥狀穩(wěn)定，為下一步的移植實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)?！　≡诒敬螌?shí)驗(yàn)中，旨在探討以下幾方面內(nèi)容：1.構(gòu)建的脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)動(dòng)物模型能否作為移植受體；2.胚胎小腦內(nèi)能否分離獲取到神經(jīng)干/祖細(xì)胞，以及其分化情況；3.神經(jīng)干/祖細(xì)胞移植到脊髓小腦萎縮受體的小腦內(nèi)，能否存活和分化情況；4.移植的神經(jīng)干/祖細(xì)胞能否糾正和改善小腦功能缺陷和臨床癥狀。本實(shí)驗(yàn)將成年健康SD大鼠作為研究對(duì)象，通過化學(xué)藥物誘導(dǎo)產(chǎn)生小

3、腦為萎縮的動(dòng)物模型；與正常大鼠比較，觀察步態(tài)和步距大小以判別其平衡功能以及形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，誘導(dǎo)大鼠的癥狀典型、形態(tài)學(xué)符合脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)的病理學(xué)改變，可以作為研究的移植受體。從人胚胎小腦中，我們可以分離得到神經(jīng)干/祖細(xì)胞，在體外能分化為神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞。移植的神經(jīng)前體細(xì)胞在移植1周后即發(fā)現(xiàn)存活，免疫組化證實(shí)可以分化為神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。移植2周后，模型鼠的運(yùn)動(dòng)功能有輕度改善，1月時(shí)可見明顯改善，之后癥狀略有加重。　　研究表明，