線蟲脊髓小腦性共濟失調(diào)相關(guān)基因atx-3的功能研究.pdf

1、背景:脊髓小腦性共濟失調(diào)(Spinocerebellar ataxia，SCA)是一組具有高度臨床和遺傳異質(zhì)性的常染色體顯性遺傳性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病。其臨床癥狀以小腦性共濟失調(diào)為主要特征。目前，已至少有20個SCAs的致病基因被定位克隆。但是這些致病基因在SCAs的發(fā)病機制中的具體作用仍不十分清楚。SCA3（亦稱為Machado-Joseph?。┦鞘澜绶秶鷥?nèi)最常見的SCA亞型，其發(fā)病主要是由于致病基因ataxin-3的C末端發(fā)生多聚谷氨

2、酰胺數(shù)目的異常擴增引起。為了進(jìn)一步了解ataxin-3的正常生理功能，我們對ataxin-3的線蟲同源基因atx-3在壽命調(diào)節(jié)和應(yīng)激抵抗中的作用進(jìn)行了研究，并探索其與胰島素-胰島素樣生長因子1信號通路(IIS)的關(guān)系。
　　方法:我們構(gòu)建了chn-1(by155);atx-3(gk193)雙突變線蟲(chn-1為熱休克蛋白同源蛋白70羧基端作用蛋白編碼基因CHIP的線蟲同源基因，CHIP突變可導(dǎo)致常染色體隱性遺傳小腦性共濟失調(diào)）;

3、隨后，分別檢測了N2野生型，chn-1(by155)，atx-3(gk193)，chn-1(by155);atx-3(gk193)4種品系線蟲在20℃和35℃熱休克條件下的壽命和運動能力;同時我們利用上述4種品系線蟲通過雜交獲得包含daf-2(e1370)或daf-16(m26)的IIS相關(guān)雜交線蟲，并分別檢測了其在20℃和35℃熱休克條件下的壽命和運動能力。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)N2， chn-1(by155)，atx-3(gk1

4、93)，chn-1(by155);atx-3(gk193)4種品系線蟲在20℃的壽命和運動能力沒有顯著差異;在熱休克情況下，chn-1突變線蟲表現(xiàn)出壽命縮短和運動衰退的表型，而atx-3突變可以提高chn-1突變線蟲的壽命和運動能力;在熱休克情況下，daf-2突變明顯提高atx-3突變、chn-1突變和atx-3、chn-1雙突變線蟲的壽命和運動能力，而daf-16突變可縮短及減弱atx-3突變和atx-3、chn-1雙突變線蟲的壽命和