ERK-NF-ΚB參與膽紅素誘導(dǎo)海馬神經(jīng)細胞凋亡的調(diào)控研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   探討細胞外信號調(diào)節(jié)蛋白激酶(ERK)1/2和核轉(zhuǎn)錄因子-KB(NF-κB)在膽紅素誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)細胞凋亡過程中的作用。
   方法:
   無菌條件下,取17-19日胎齡的SD大鼠的海馬組織,原代培養(yǎng)8天,神經(jīng)元鑒定及純度測定后完全隨機法分為3組:處理組(膽紅素處理神經(jīng)元)、抑制組(ERK1/2抑制劑PD98059+膽紅素)以及對照組(加DMSO)。采用改良噻唑藍比色法(MTT法)和Hoechst3

2、3342DNA染色法,觀察各組細胞存活率及形態(tài)學(xué)特征;流式細胞儀分析細胞凋亡;免疫細胞化學(xué)檢測NF-κB蛋白的表達。
   結(jié)果:
   (1)處理組細胞存活率(85.418±1.406)%,明顯低于對照組的(99.990±2.782)%,而高于抑制組的(63.951±1.148)%(P<0.01);
   (2)處理組細胞凋亡率(20.767±1.662)%,明顯高于對照組(4.2±1.058)%,而低于抑制組

3、(35.167±1.041)(P<0.01);
   (3)處理組海馬神經(jīng)細胞中亞單倍體DNA(4.15%),明顯高于對照組的(1.62%),而低于抑制組的(5.38%);
   (4)處理組NF-κB蛋白光密度值、陽性細胞率(0.306±0.072)、(6.882±2.626)%,對照組和抑制組NF-κB蛋白光密度值、陽性細胞率分別為(0.157±0.037)、(0.986+0.795)%,(0.249±0.059)、

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