鐵皮石斛的快速繁殖及其次生代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、本試驗(yàn)探討了基本培養(yǎng)基、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、培養(yǎng)條件、接種方式、碳源等因素對(duì)鐵皮石斛擬原球莖的誘導(dǎo)和增殖、分化培養(yǎng)的影響以及培養(yǎng)基成分、培養(yǎng)條件等對(duì)擬原球莖中的藥用有效成分，如石斛多糖、總生物堿等的積累的影響進(jìn)行了研究，研究結(jié)果如下： 1．通過(guò)比較MS、LS、B5、N6、H、Nitsch、White和WPM8種基本培養(yǎng)基對(duì)鐵皮石斛擬原球莖的誘導(dǎo)、增殖、分化和試管苗壯苗生根的影響，發(fā)現(xiàn)N<,6>培養(yǎng)基適合于鐵皮石斛擬原球莖誘導(dǎo)和增殖，

2、B5培養(yǎng)基適合擬原球莖的分化培養(yǎng)和試管苗的壯苗生根。 2．2，4-D、NAA和IBA三種生長(zhǎng)素均可誘導(dǎo)出擬原球莖，誘導(dǎo)率都在65％以上，其中以0.5 mg/L2，4-D，0.5-1.0mg/LNAA，1.0mg/LIBA效果最好。2，4-D和6-BA，以及2，4-D和KT結(jié)合使用均不利于擬原球莖誘導(dǎo)和增殖。1.0mg/LNAA+0.3-0.5 mg/L6-BA、1.0mg/L IBA+0.5 mg/L6-BA誘導(dǎo)出的擬原球莖生長(zhǎng)

3、旺盛，富有光澤，有利于進(jìn)一步繼代培養(yǎng)。 在誘導(dǎo)擬原球莖的分化培養(yǎng)中，單獨(dú)使用NAA時(shí)，以0.5 mg/L效果最好。如果把NAA與細(xì)胞分裂素配合使用，以0.5mg/L NAA+0.5mg/L6-BA的組合最有利于擬原球莖的分化，并且擬原球莖生長(zhǎng)量明顯大于單獨(dú)使用NAA時(shí)的生長(zhǎng)量。高濃度NAA和高濃度的6-BA配合使用則會(huì)對(duì)擬原球莖的分化產(chǎn)生抑制作用。 在試管苗壯苗生根培養(yǎng)中，單獨(dú)使用IBA時(shí)，以1.0 mg/L效果最好。如

4、果把IBA與NAA配合使用，以0.3mg/L NAA+1.0mg/L6-BA的組合最有利于試管苗的壯苗和生根。 3．?dāng)M原球莖誘導(dǎo)和增殖pH值以5.8比較適宜；培養(yǎng)過(guò)程中的光照條件以12h光照加12h黑暗有利于擬原球莖誘導(dǎo)和增殖；接種時(shí)將長(zhǎng)度為0.7cm的莖段橫放時(shí)誘導(dǎo)效果最好。 4．碳源對(duì)比表明，分析純的蔗糖比葡萄糖和市售普通白糖更有利于擬原球莖誘導(dǎo)和增殖。當(dāng)蔗糖濃度為40mg/L時(shí)不僅有利于擬原球莖的增長(zhǎng)，也有利于石斛

5、多糖的積累。 5．系統(tǒng)研究了B<,5>培養(yǎng)基中大量元素、微量元素、蔗糖濃度對(duì)鐵皮石斛試管苗壯苗生根及次生代謝產(chǎn)物積累的影響。實(shí)驗(yàn)證明：增加培養(yǎng)基中KNO<,3>、（NH<,4>）<,2>SO<,4>、ZnSO<,4>和FeSO<,4>的含量有利于擬原球莖生長(zhǎng)，而不利于石斛多糖和總生物堿的積累；MgSO<,4>對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和石斛多糖、生物堿的積累均起抑制作用；增加培養(yǎng)基中NaH<,2>PO<,4>、CaCl<,2>的濃度不僅有利于