RON變異體RONΔ170對(duì)自身酪氨酸磷酸化變異體RONΔ160的顯性抑制作用.pdf

1、目的：
　　 研究受體型酪氨酸激酶RON的變異體RONΔ170對(duì)RON的自身酪氨酸磷酸化變異體RONΔ160的作用。
　　 方法：
　　 NIH-3T3和3T3-RONΔ160細(xì)胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒pcDNA3.1-RONΔ170，建立3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170細(xì)胞株；流式細(xì)胞儀胞膜蛋白免疫熒光法檢測RONA170蛋白的表達(dá)；免疫沉淀法檢測細(xì)胞RON的酪氨酸磷酸化；軟瓊脂培養(yǎng)法觀察RONΔ170

2、對(duì)3T3和3T3-RONΔ160細(xì)胞生長能力的作用；體外跨室趨化運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)檢測RONΔ170對(duì)3T3和3T3-RONΔ160細(xì)胞移動(dòng)浸潤能力的作用。
　　 結(jié)果：
　　 成功建立3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170細(xì)胞株，流式細(xì)胞儀胞膜蛋白檢測法證明其穩(wěn)定表達(dá)RONΔ170蛋白；免疫沉淀試驗(yàn)結(jié)果顯示RONΔ170能顯著抑制RONΔ160的RON酪氨酸磷酸化；軟瓊脂生長實(shí)驗(yàn)示3T3，3T3-RONΔ160，

3、3T3-RONΔ170和3T3-RONΔ160Δ170細(xì)胞生長克隆數(shù)分別為12.33±2.08，121.33±12.58，14.00±3.00和34.33±8.32，3T3-RONΔ160Δ170與3T3-RONΔ160比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，t=7.93，P<0.05；體外跨室趨化運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果示4組細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)分別24.50±3.50，399.00±13.00，31.00±6.00和200.50±11.50，3T3-RONΔ160Δ