多發(fā)性骨髓瘤實驗診斷及治療前后血清蛋白質(zhì)組的比較研究.pdf

1、第一部分目的：研究多發(fā)性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)細胞形態(tài)學及其它實驗室相關指標特征，探討這些方法學在多發(fā)性骨髓瘤診斷中的應用價值。 方法：回顧性分析18例IgG型多發(fā)性骨髓瘤患者的實驗室檢查資料。 結果：18例IgG型多發(fā)性骨髓瘤中17例骨髓片發(fā)現(xiàn)原、幼漿細胞及漿細胞形態(tài)異常；13例有不同程度的貧血(血紅蛋白平均為87.4g/L)；10例腎功能有明顯改變，尿素氮平均為12.8mmol/L；同時17

2、例檢出了M蛋白。 結論：骨髓瘤細胞形態(tài)學結合其它實驗室相關指標檢查，能夠準確地應用于多發(fā)性骨髓瘤的診斷，從而為臨床診斷提供可靠依據(jù)。 第二部分 1.建立一種研究多發(fā)性骨髓瘤的蛋白質(zhì)組學方法。 2.比較研究多發(fā)性骨髓瘤患者治療前、后兩組血清中蛋白質(zhì)表達譜的改變，篩查能評價多發(fā)性骨髓瘤治療效果和預后盼關鍵蛋白質(zhì)分子。 方法： 選擇臨床確診為多發(fā)性骨髓瘤的患者治療前的血清(A組)18例、治療后的

3、血清(B組)7例，將同一組標本混合后，提取各組血清總蛋白。應用雙向凝膠電泳分離總蛋白(相同條件下對各組總蛋白樣品分別進行3次雙向電泳)，然后用Image Master5.O軟件對各組的全蛋白質(zhì)組表達譜進行差異分析(多發(fā)性骨髓瘤治療前組VS多發(fā)性骨髓瘤治療后組)，最后應用MALDI-TOF-MS和數(shù)據(jù)庫搜索鑒定差異顯著的蛋白點。 結果： 各組檢測到的蛋白點數(shù)如下：多發(fā)性骨髓瘤治療前組957個，多發(fā)性骨髓瘤治療后組896個。

4、以各組中2-DE效果好、點數(shù)多的一塊膠作為參考膠，進行2組間的匹配分析，篩選出兩組之間差異≥2倍且在≥50％的膠中均存在的蛋白點99個。挖取差異較大、蛋白斑點較濃、分離較清晰的65個蛋白點，應用質(zhì)譜鑒定出Ig lambda C、Ig kappa chain AM37 precursor 等17種蛋白質(zhì)。 結論： 1.應用“雙向凝膠電泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)結合基質(zhì)輔助

5、的激光解析離子化飛行時間質(zhì)譜(matrix assisted laserdesorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)”這種蛋白質(zhì)組學技術可對多發(fā)性骨髓瘤治療前組和治療后組的全蛋白質(zhì)差異表達譜進行分析，并篩查出差異較大的蛋白點，可作為多發(fā)性骨髓瘤的蛋白質(zhì)組學研究方法。 2.治療前的多發(fā)性骨髓瘤血清與治療后的血清表現(xiàn)出的蛋白表達譜具有明顯的差異性，推