2-甲氧基雌二醇及其羥丙基-β-環(huán)糊精包含物細(xì)胞藥效和藥動(dòng)學(xué)初步研究.pdf

1、背景及目的:2-甲氧基雌二醇(2-ME)是雌激素的生理性代謝產(chǎn)物，但本身幾乎沒有雌激素活性，近年來研究發(fā)現(xiàn)其具有較好的抗腫瘤活性。由于其水溶性低，口服吸收差，易代謝，因而將其制成各種制劑來提高其藥用價(jià)值。本文就對(duì)其原料藥及其羥丙基-β-環(huán)糊精（HP-β-CD）包合物對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的抑制作用進(jìn)行比較研究;初步探索原料藥和制劑細(xì)胞內(nèi)的代謝動(dòng)力學(xué)規(guī)律;探討原料藥和制劑進(jìn)入細(xì)胞的機(jī)制和細(xì)胞外排機(jī)制。整體評(píng)價(jià)制劑的作用效果，并為2-甲氧基雌二醇的

2、制劑研究提供理論依據(jù)。
　　 方法:本實(shí)驗(yàn)采用磺?；_丹明B(SRB)法測(cè)定原料藥及制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞生長情況的影響;采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)檢測(cè)原料藥及制劑對(duì)MCF-7細(xì)胞的周期阻滯情況;應(yīng)用熒光Hoechst33342/PI雙染法檢測(cè)MCF-7細(xì)胞凋亡情況;采用HPLC-FLD進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)藥物含量測(cè)定及細(xì)胞內(nèi)藥物代謝動(dòng)力學(xué)規(guī)律探索;利用能量抑制劑疊氮鈉(NaN3)及P-糖蛋白抑制劑環(huán)孢素A(CyA)初步探索原料藥和制劑進(jìn)入細(xì)胞及細(xì)

3、胞外排機(jī)制。
　　 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:2-ME及2-ME/HP-β-CD包合物對(duì)PC-3、SGC-7901、HepG2細(xì)胞的生長具有良好的抑制作用，并呈現(xiàn)出一定的時(shí)間和濃度依賴性。而對(duì)于MCF-7細(xì)胞，只有原料藥對(duì)其增殖抑制具有時(shí)間依賴性、濃度依賴性;而制劑只有濃度依賴性卻不具有時(shí)間依賴性。通過研究藥物作用下MCF-7細(xì)胞周期阻滯和凋亡情況，發(fā)現(xiàn)制劑與原料藥對(duì)MCF-7細(xì)胞作用機(jī)制基本相同。細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究表明:四種細(xì)胞對(duì)原料藥

4、的代謝規(guī)律基本相同。對(duì)MCF-7、PC-3兩種細(xì)胞進(jìn)行原料藥和制劑的代謝規(guī)律進(jìn)一步研究，發(fā)現(xiàn)PC-3細(xì)胞對(duì)原料藥和制劑的代謝規(guī)律基本相同;MCF-7細(xì)胞則有差別，說明不同細(xì)胞代謝機(jī)制可能不完全相同。以PC-3，MCF-7兩種細(xì)胞為研究對(duì)象，對(duì)原料藥及制劑入胞及外排機(jī)制進(jìn)行研究，結(jié)果表明:兩者進(jìn)入細(xì)胞方式均為不耗能的被動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，外排則都不受P-糖蛋白的介導(dǎo)。
　　 結(jié)論:通過實(shí)驗(yàn)說明制劑在改變?cè)纤幉涣嘉锢硖匦缘耐瑫r(shí)，對(duì)于原料藥的藥