2-甲氧基雌二醇體外抗腫瘤活性的研究.pdf

1、背景與目的:胃癌作為一種惡性腫瘤，越來越高發(fā)于現(xiàn)今的人群，且致死率極高，患病人群呈現(xiàn)年輕化趨勢，嚴(yán)重影響人民的生活質(zhì)量，對人類生命是一大威脅。雖然傳統(tǒng)的治療手段與方法對胃癌患者生存率的提高有一定作用，但是治愈率仍然很低，存活年限也不令人滿意。神經(jīng)母細(xì)胞瘤(Neuroblastoma，NB)是兒童最常見的顱外腫瘤，也是嬰幼兒較常見的腫瘤，惡性程度高，死亡率也較高，目前對其治療已經(jīng)引起高度重視。2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestra

2、diol，2-ME）為雌激素的天然代謝物，為新發(fā)現(xiàn)的一種抗腫瘤藥物，對多種腫瘤均顯示良好的抗腫瘤活性，本實(shí)驗(yàn)旨在研究其對多種腫瘤細(xì)胞的抑制率，與其它抗腫瘤藥物聯(lián)用時(shí)對神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH和胃癌細(xì)胞SGC-7901的抑制作用，以及單獨(dú)用藥時(shí)對這兩種細(xì)胞凋亡和周期的影響。
　　 方法:SRB法檢測2-ME對11種人類腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用，SRB法檢測2-ME聯(lián)用其它常見抗腫瘤藥物處理入神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH和人胃

3、癌SGC-7901細(xì)胞后的協(xié)同指數(shù)，Hoechst33342/PI雙染檢測不同濃度的2-ME對SK-N-SH和SGC-7901細(xì)胞凋亡的影響，流式細(xì)胞儀檢測經(jīng)2-ME處理后兩種細(xì)胞凋亡和周期的變化，蛋白免疫印跡法(Western blot)檢測不同濃度的2-ME對上述兩種細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果:2-ME對所選11種人類腫瘤細(xì)胞均有很好抗腫瘤效果，對從中選出的SK-N-SH細(xì)胞和SGC-7901細(xì)胞作用72h的

4、IC50值分別是0.663μ mol/L和0.231μ mol/L;2-ME和5-FU聯(lián)用時(shí)，對SK-N-SH作用48h的協(xié)同指數(shù)為1.199(CI＞1)顯示出拮抗作用，聯(lián)用72h的協(xié)同指數(shù)為0.498(CI＜1)表現(xiàn)為協(xié)同作用，而2-ME和冬凌草甲素聯(lián)用于SK-N-SH細(xì)胞48h和72h后的協(xié)同指數(shù)是1.044和1.613，分別表現(xiàn)為相加和拮抗作用;2-ME和冬凌草甲素聯(lián)用于人胃癌SGC-7901細(xì)胞48h和72h的結(jié)合指數(shù)分別是1.

5、037和3.087，表現(xiàn)為相加和拮抗作用;Hoechst33342/PI雙染檢測表明2-ME作用48h后人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-SH和人胃癌SGC-7901細(xì)胞呈明顯凋亡形態(tài)，熒光顯微鏡下可見凋亡小體的出現(xiàn);流式細(xì)胞儀檢測得到2-ME能將SK-N-SH和SGC-7901細(xì)胞阻滯在G2/M期并誘導(dǎo)它們的凋亡，并且呈現(xiàn)濃度和劑量依賴性;Western blot檢測表明，上述兩種細(xì)胞經(jīng)2-ME處理48h后，Bel-2蛋白的表達(dá)均下調(diào)。