月季再生體系的建立及葉盤法轉(zhuǎn)化月季‘薩蔓莎’的研究.pdf

1、月季以其花朵美麗、花色多樣、香味濃郁、四季開花等深受人們的喜愛。月季在我國廣泛栽培，是城市綠化的主要材料。作為世界四大鮮切花之一，月季有很高的商品價值。本試驗以切花月季‘薩蔓莎’小葉片為外植體優(yōu)化了其再生體系和遺傳轉(zhuǎn)化體系。同時以離體小葉片為外植體，建立了15個切花月季品種的直接器官發(fā)生的再生體系。其主要研究結(jié)果如下： 1．通過‘薩蔓莎’小葉片離體培養(yǎng)探討暗培養(yǎng)時間和碳源種類對再生的影響，優(yōu)化了通過器官發(fā)生途徑誘導(dǎo)形成不定芽的再

2、生體系。結(jié)果表明：月季小葉片外植體在誘導(dǎo)培養(yǎng)基（1／2MS+1.5mg／L TDZ+0.05mg／L NAA+10mg／AgNO<,3>+3％Gluose+0.25％GEL）上黑暗培養(yǎng)15d，之后轉(zhuǎn)入擴繁培養(yǎng)基（MS+0.5mg／LBA+0.004mg／L NAA+0.1mg／L GA<,3>）中光下培養(yǎng)，再生效果最好，在小葉片葉柄及主脈的切口處都可以再生不定芽。其不定芽誘導(dǎo)率最高可達到95.0％以上，其不定芽在擴繁培養(yǎng)基上培養(yǎng)4周后植

3、株再生率達60.0％以上，平均再生枝數(shù)為2.0個／小葉片。 2．建立了15種月季切花品種葉片直接再生體系，比較了不同基因型和不同植物生長調(diào)節(jié)劑組合對月季再生的影響。研究結(jié)果表明：基因型是影響葉片直接再生的首要因素。在8種添加TDZ的培養(yǎng)基上，‘蒙特蘇瑪’的植株再生率最高，其不定芽誘導(dǎo)率和植株再生率最高分別為86.5％和50.0％，‘格倫娣·蓋拉’再生芽率最低為5.7％?！倒濉仓暝偕首畹蜑?.9％?；蛐筒煌?，再生所需最

4、適植物生長調(diào)節(jié)劑組合不同。當誘導(dǎo)培養(yǎng)基中細胞分裂素（FDZ）與生長素（NAA）比值為10.30時，多數(shù)品種可獲得最高不定芽誘導(dǎo)率。同時，取其中8個品種的小葉片為外植體，試驗BA對誘導(dǎo)植物再生的影響，結(jié)果表明：盡管在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中加入BA可以誘導(dǎo)月季不定芽的產(chǎn)生，但是最終沒有再生成植株。 3．通過對GUS基因瞬時表達率及抗性芽率的分析，優(yōu)化了以月季品種‘薩蔓莎’小葉片作為根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化的受體的遺傳轉(zhuǎn)化體系，結(jié)果表明：滲透處理是