海島棉再生體系的建立及遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、近年來，棉花的體細胞組織培養(yǎng)己經(jīng)有了較大的發(fā)展，但是大多集中在少數(shù)品種上，尤其是一些模式品種，而且仍然存在著許多尚未解決的問題，如胚狀體萌發(fā)率偏低、畸形苗率較高、再生周期長等問題。所以，不斷發(fā)展新的再生體系和拓寬棉花再生植株的品種數(shù)量是目前棉花組織培養(yǎng)的趨勢。基因工程和分子生物學的發(fā)展促使轉(zhuǎn)基因技術廣泛地應用于棉花育種，使棉花育種能夠?qū)崿F(xiàn)分子設計，將外源有益基因?qū)朊藁毎?，并使其定向而穩(wěn)定地遺傳。建立高效而穩(wěn)定的棉花遺傳轉(zhuǎn)化體系，是保

2、證棉花轉(zhuǎn)基因獲得大量可供篩選群體的前提條件。因此，建立高效的棉花體細胞胚胎發(fā)生和植株再生體系，對于棉花基因工程，功能基因組和現(xiàn)代棉花育種具有重要的意義。 本研究以新疆海島棉和陸地棉作為實驗材料，著重從海島棉體細胞胚發(fā)生和器官發(fā)生再生植株途徑的角度考慮，進行下胚軸愈傷誘導和莖尖培養(yǎng)植株再生的研究，探討海島棉體細胞胚發(fā)生和莖尖再生，以及農(nóng)桿菌介導遺傳轉(zhuǎn)化的主要影響因素。 1.以海島棉品種為實驗材料，采用下胚軸、子葉、和根作為

3、外植體誘導愈傷，通過對多種激素及其配比、碳源、無機鹽、氨基酸等對愈傷組織和胚性愈傷組織的誘導和分化效應進行了研究，結果表明，0.1-1.0mg/L NAA+0.1-1.0mg/L KT。這一激素配比最適合誘導海島棉愈傷組織；繼代時間的長短影響了胚胎的發(fā)生，長期繼代使愈傷組織瘋長程度加強，抑制了細胞的分化。 2.以海島棉和陸地棉品種為實驗材料，采用莖尖作外植體，6-BA來啟動和誘導叢生芽的發(fā)生，叢生芽數(shù)可以達到12個。 3