血小板第4因子對(duì)急性輻射損傷小鼠的保護(hù)作用及其機(jī)制的初步探討.pdf

1、放療是當(dāng)今治療惡性腫瘤最常用的方法之一，但是放射線在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，對(duì)機(jī)體正常免疫系統(tǒng)和造血系統(tǒng)的影響不可忽視。已經(jīng)證實(shí)輻射所致的免疫系統(tǒng)損傷有兩大顯著特點(diǎn)，一是早期損傷嚴(yán)重，表現(xiàn)在低劑量照射后即可引起淋巴器官的明顯損傷；二是后期恢復(fù)緩慢，雖然淋巴器官的組織學(xué)結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)，然而淋巴細(xì)胞數(shù)量仍然明顯低于正常水平，特別是外周血淋巴細(xì)胞一直維持在較低水平。輻射(1-7Gyγ射線)對(duì)造血系統(tǒng)的影響主要表現(xiàn)在骨髓造血抑制、骨髓基質(zhì)出血水腫及造

2、血微環(huán)境的紊亂，從而導(dǎo)致放療患者免疫力低下，易出現(xiàn)感染、出血等并發(fā)癥。 血小板第4因子(PF4)屬于CXC類趨化因子家族成員，最初的研究集中在其可能的促凝血作用，然而后來的體外研究描述了一些其他表面上不相關(guān)的生物功能，包括抑制血管新生和調(diào)節(jié)造血干/祖細(xì)胞增殖，促進(jìn)中性粒細(xì)胞的粘附性等，因此被稱作是趨化因子之謎。先前的研究已經(jīng)證實(shí)PF4不僅能延長(zhǎng)輻射損傷小鼠的生存時(shí)間，增加小鼠的存活率，加速體內(nèi)粒-巨噬系集落形成單位(CFU-GM

3、)的恢復(fù)，而且能保護(hù)經(jīng)環(huán)磷酰胺(CTX)預(yù)處理小鼠骨髓的造血功能，減輕CTX對(duì)胸腺、脾臟細(xì)胞的損傷，說明PF4對(duì)小鼠造血系統(tǒng)有明確的放化療保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)基于實(shí)驗(yàn)室原有實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究PF4對(duì)急性輻射損傷小鼠免疫系統(tǒng)及骨髓細(xì)胞的保護(hù)作用，并對(duì)其保護(hù)機(jī)制進(jìn)行初步探討。 目的：探討PF4對(duì)急性輻射損傷小鼠免疫系統(tǒng)及骨髓細(xì)胞的保護(hù)作用，并對(duì)其保護(hù)機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法：雄性BALB/c小鼠隨機(jī)分為三組：第Ⅰ組(照

4、射組)、第Ⅱ組(PF4+照射組)、第Ⅲ組(正常對(duì)照組)。PF4+照射組在照射前26h及20h腹腔注射PF440μg·kg-1，前兩組全身一次性60Co-γ射線照射。照射后用瑞氏染色法計(jì)數(shù)外周血淋巴細(xì)胞百分?jǐn)?shù)變化；胸腺、脾臟制成細(xì)胞懸液計(jì)數(shù)后，MTT比色法測(cè)定胸腺及脾細(xì)胞增殖能力；照射后第1、2、4、8天流式細(xì)胞儀測(cè)定小鼠骨髓細(xì)胞的細(xì)胞周期；免疫組化法動(dòng)態(tài)觀察骨髓基質(zhì)細(xì)胞p21蛋白表達(dá)水平變化。 結(jié)果：PF4+照射組小鼠外周血淋巴

5、細(xì)胞百分?jǐn)?shù)下降趨勢(shì)較照射組明顯減慢。胸腺、脾細(xì)胞計(jì)數(shù)，PF4+照射組明顯高于照射組。淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)，第Ⅱ組與第Ⅰ組相比，小鼠胸腺及脾細(xì)胞的增殖能力明顯增強(qiáng)。流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期，G0+G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)照射后第1、2天的照射組及照射后第1天的PF4+照射組均明顯高于正常對(duì)照組，而各時(shí)間點(diǎn)的照射組與PF4+照射組之間亦存在明顯差異。照射后第2、8天PF4+照射組的G0+G1期細(xì)胞百分?jǐn)?shù)與正常對(duì)照組無明顯差異。免疫組化結(jié)果顯示照射后第2、