精神應(yīng)激與心律失常發(fā)生機(jī)制的研究.pdf

1、目的：
　　 1.通過各種長期慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)方式建立應(yīng)激大鼠的抑郁模型，觀察在建模過程中實(shí)驗(yàn)大鼠及氟西汀藥物干預(yù)組大鼠的體重、攝食量、糖水消耗與體重比和糖水偏愛百分比、開箱實(shí)驗(yàn)中行為學(xué)改變、糞便粒數(shù)改變等，探討慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激抑郁大鼠模型建立的可行性和此模型的有效性；
　　 2.采用微電極陣列記錄技術(shù)研究胸1～5脊髓及心臟場電位變化，利用病理染色技術(shù)、免疫熒光、激光共聚焦掃描顯微鏡研究慢性應(yīng)激抑郁大

2、鼠模型心臟局部組織的病理變化、GAP-43、TH、CHAT的染色結(jié)果，探討慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激抑郁大鼠模型心臟病理變化及交感神經(jīng)重構(gòu)與胸1～5脊髓及心臟場電位變化的關(guān)系；
　　 3.探討伴抑郁及焦慮情緒障礙的心律失常患者HRV時(shí)域指標(biāo)及在健康、社會支持、睡眠、生活事件等不同心理狀態(tài)下的特點(diǎn)及對心律失常的影響。
　　 方法：
　　 1.實(shí)驗(yàn)前對每只動物進(jìn)行敞箱實(shí)驗(yàn)，水平運(yùn)動和垂直運(yùn)動篩選，總得分低于30分或高于1

3、20分的動物予以剔除，共入組30只，采用成組設(shè)計(jì)隨機(jī)數(shù)字表法將大鼠分為3組：抑郁模型組（以下簡稱抑郁組）和正常對照組（以下簡稱對照組），應(yīng)激+氟西汀治療組（以下簡稱藥物組），每組10只。正常對照組群養(yǎng)，不給任何刺激。單純抑郁組和應(yīng)激+氟西汀治療組（每日腹腔注射氟西汀10 mg/ kg進(jìn)行治療，持續(xù)21d），采取分籠單養(yǎng)（孤養(yǎng)）的方式喂養(yǎng)。單純抑郁組在21天中隨機(jī)施加11種刺激，每種刺激重復(fù)1～2次，每次為一個(gè)周期。應(yīng)激+帕羅西汀治療組應(yīng)

4、激和喂養(yǎng)方法同單純應(yīng)激組，在實(shí)驗(yàn)開始第一天即給予氟西汀治療。并在實(shí)驗(yàn)開始前、第一次應(yīng)激7天結(jié)束后、第二次應(yīng)激14天結(jié)束后、第三次應(yīng)激21天結(jié)束后分別測量每只大鼠體重、飲用水、攝食量，記錄蔗糖消耗試驗(yàn)以及敞箱試驗(yàn)中水平運(yùn)動、垂直運(yùn)動行為、清潔運(yùn)動、糞便粒數(shù)等各項(xiàng)指標(biāo)，分析應(yīng)激對大鼠的影響以及抗抑郁藥物與大鼠抑郁癥狀和體重、蔗糖攝入量和行為學(xué)指標(biāo)的相關(guān)關(guān)系；
　　 2.應(yīng)用蘇木素伊紅HE染色和Massion染色及電鏡觀察心臟病理變化

5、，在左心室心尖部應(yīng)用免疫熒光、激光共聚焦掃描顯微鏡技術(shù)觀察大鼠的心臟局部組織的GAP-43、TH、CHAT染色結(jié)果。采用MEA技術(shù)觀察大鼠的胸1～5脊髓神經(jīng)和左、右心房及左右心室肌組織局部場電位時(shí)程（FAPD）的變化規(guī)律；
　　 3.198例心律失常人院患者及正常健康人群50例（對照組）進(jìn)行抑郁、焦慮自評量表、健康測量量表、匹茨堡睡眠質(zhì)量指數(shù)量表、社會支持評定量表、生活事件量表測評，共收集伴抑郁的心律失?；颊?7名（抑郁組），伴

6、焦慮的心律失?；颊?8名（焦慮組），同時(shí)伴抑郁和焦慮共病的心律失?；颊?8名（共病組），不伴抑郁或焦慮的心律失常患者55名（病例組），進(jìn)行動態(tài)心電圖等常規(guī)檢查，分析HRV時(shí)域指標(biāo)。
　　 結(jié)果：
　　 1.與對照組比較，經(jīng)歷慢性輕度不可預(yù)見性應(yīng)激的抑郁組大鼠體重、攝食量在應(yīng)激前（200.35±13.57）g、（40.35±5.45）g較實(shí)驗(yàn)后（279.60±17.24）g、（12.63±2.24）g顯著下降（P＜0.01

7、）。抑郁組敞箱試驗(yàn)中的水平運(yùn)動、垂直運(yùn)動得分應(yīng)激前（38.42±3.36）、（18.21±2.46）較實(shí)驗(yàn)后（12.34±0.51）、（10.45±1.32）顯著下降（P＜0.01），中央格停留時(shí)間明顯延長，清潔動作次數(shù)應(yīng)激前（18.24±1.87）較實(shí)驗(yàn)后（8.39±0.67）顯著下降（P＜0.01），抑郁組液體消耗試驗(yàn)中糖水消耗與體重比和糖水偏愛百分比應(yīng)激前（80.43±7.35）、（68.04±4.35）實(shí)驗(yàn)后（14.75±3.3

8、1）、（16.34±3.51）明顯下降（P＜0.01）。以上各指標(biāo)藥物組與對照組應(yīng)激前及應(yīng)激14天后比較無顯著差異，各指標(biāo)應(yīng)激前分別為（217.21±15.92）、（41.72±5.90）、（37.36±5.23）、（16.34±1.45）、（18.32±1.75）、（81.32±6.78）、（65.18±7.56）在應(yīng)激實(shí)驗(yàn)21天后以上各指標(biāo)（307.51±33.23）、（28.50±6.28）、（27.48±2.42）、（12.86

9、±1.07）、（14.75±1.37）、（37.51±7.15）、（55.50±5.13）與對照組有差異（P＜0.01）。抑郁組糞便粒數(shù)應(yīng)激前（8.26±0.67）較實(shí)驗(yàn)后（15.40±1.57）顯著增加（P＜0.01），藥物組與對照組無顯著差異（P＜0.05）；
　　 2.HE染色顯示抑郁組大鼠心肌細(xì)胞間質(zhì)局灶性出現(xiàn)中心粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤。對照組大鼠及藥物組大鼠心肌細(xì)胞間質(zhì)未出現(xiàn)中心粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞浸潤。抑郁組大鼠心肌細(xì)胞間

10、質(zhì)膠原纖維、GAP-43、TH、CHAT大量增生[（46.67±5.75）%、（22.10±2.42）、（30.10±1.59）、（43.40±1.57）]，與對照組[（14.10±1.85）%、（13.70±1.82）、（23.60±2.22）、（32.00±1.76）]，有顯著差異（P＜0.05，P＜0.01）。藥物干預(yù)組大鼠心肌纖維化（17.23±2.79）%與對照組（14.10±2.85）%無顯著差異（P＞0.05）。藥物干預(yù)組

11、大鼠GAP-43、TH、CHAT增生（16.20±1.32、27.17±3.88、37.50±4.97）與正常對照組（13.70±1.82、23.60±2.22、32.00±1.76）有顯著差異（P＜0.01）；
　　 3.心電圖示抑郁組、藥物組P波[（35.09±3.23）ms，（35.43±3.41）ms]比正常對照組P波（25.43±1.27）ms延長（P＜0.05）。抑郁組、藥物組大鼠慢性應(yīng)激后胸1～5脊髓神經(jīng)場電位時(shí)程

12、[500mv，（144.25±12.63）ms，（134.32±11.23）ms及1000mv，（152.38±10.86）ms，（142.67±18.78）ms]顯著高于對照組[500mv，（79.56±8.01）及1000mv，（83.14±4.61）]ms，右心房心肌組織場電位時(shí)程（11.17±0.60）ms顯著長于對照組右心房（10.25±1.94）ms。藥物組右心房心房肌組織場電位時(shí)程（11.34±1.00）ms顯著長于對照組

13、右心房（P＜0.05）。抑郁組、藥物組左右心房局部動作電位[（125.09±6.22）ms、（189.89±14.68）ms和（122.43±19.34）ms、（172.56±26.45）ms]分別長于正常組左右心房[（92.59±7.61）ms、（105.18±15.94）ms]（P＜0.05）。抑郁組、藥物組右心房心房肌組織場電位離散度[（629.82±90.68）、（620.46±86.93）ms]顯著長于正常對照組（345.72

14、±62.38）ms，（P＜0.05）；4、抑郁組[抑郁分（59.63±1.56）]、焦慮組[焦慮分（59.07±2.53）]、共病組[抑郁、焦慮分（60.96±1.33）（62.15±2.19）]均顯著高于對照組[抑郁分（33.21±1.26）、焦慮分（32.26±2.49）]，有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.01）。HRV時(shí)域指標(biāo)，抑郁組[SDNN（88.30±15.24）、SDANN（78.70±12.51）、rMSSD（22.04±2.

15、63）、PNH50（15.26±1.07）]、焦慮組[SDNN（84.87±.13.21）、SDANN（79.33±13.01）、rMSSD（22.28±3.21）、PNH50（15.43±1.22）]、共病組[SDNN（85.73±14.34）、SDANN（77.66±13.53）、rMSSD（23.83±2.47）、PNH50（15.44±1.28）]均顯著低于對照組[SDNN（128.89±16.34）、SDANN（120.37±

16、12.74）、rMSSD（45.61±5.57）、PNH50（34.72±3.53）]（P＜0.01）和病例組[SDNN（100.53±10.25）、SDANN（97.55±10.13）、rMSSD（39.51±3.07）、PNH50（25.32±2.01）]（P＜0.05）。在健康總分、生活事件總分上，焦慮組、抑郁組、病例組與對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.05）。在正性生活事件上，抑郁組與對照組明顯有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.01）。

17、在負(fù)性生活事件上，焦慮組、抑郁組、病例組與對照組有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.01）。共病組在生活事件總分及正、負(fù)性生活事件分[（39.35±3.43）、（4.27±1.24）、（35.11±2.99）]及健康總分[（90.93±12.46）]上與對照組生活事件總分、正負(fù)性生活事件[（20.56±2.78）、（9.78±3.52）、（13.48±2.47）]、健康總分[（128.73±17.68）]有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.0１）。

18、在支持總分、主觀支持分上，焦慮組[（48.86±2.30）、（29.20±1.42）]、共病組[（43.65±1.05）、（25.52±0.68）]患者與對照組 [（38.34±2.61）、（21.57±1.37）]相比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.01）。共病患者在睡眠質(zhì)量因子（1.53±0.18）、睡眠總分（7.39±0.69）高于對照組（0.65±0.04）、（4.89±0.72），與對照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異（P＜0.05）。心律失常

19、患者在睡眠總分、睡眠質(zhì)量、入睡時(shí)間、睡眠時(shí)間、睡眠效率、睡眠障礙5個(gè)因子分與對照組相比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.慢性輕度不可預(yù)見性的應(yīng)激抑郁模型中，應(yīng)激因子的多變性和不可預(yù)測性是模型成功的關(guān)鍵。慢性輕度不可預(yù)見性的應(yīng)激抑郁模型大鼠活動能力顯著下降、興趣喪失、快感缺乏與抑郁癥臨床表現(xiàn)中的精神運(yùn)動性阻抑癥狀極為相似，行為學(xué)改變可維持較長時(shí)間，且抗抑郁藥物治療有效，是較理想可靠的抑郁動物模型。該

20、模型可適用于臨床和基礎(chǔ)的各個(gè)領(lǐng)域，在醫(yī)學(xué)研究中有重要的地位；
　　 2.慢性應(yīng)激導(dǎo)致抑郁大鼠模型心肌間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤，出現(xiàn)心肌纖維化，這可能是心肌組織電興奮離散度增加的器質(zhì)性基礎(chǔ)。心臟GAP-43、TH、CHAT增多，胸1～5脊髓場電位時(shí)程延長，導(dǎo)致右心房心肌組織場電位時(shí)程延長，這可能是介導(dǎo)慢性應(yīng)激抑郁大鼠模型心律失常交感神經(jīng)重構(gòu)的基礎(chǔ)；
　　 3.伴抑郁、焦慮及焦慮抑郁共病心律失?；颊逪RV時(shí)域指標(biāo)顯著下降，表明植物神