豬鏈球菌反應(yīng)調(diào)節(jié)因子CovR重組蛋白及其抗體的制備.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、2型豬鏈球菌（Streptococcus suis serotype 2，S. Suis 2)是一種重要的人畜共患病病原菌，能導(dǎo)致人和豬的腦膜炎、敗血癥以及突發(fā)性死亡，其致病機(jī)制目前仍不明確。二元信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)在調(diào)節(jié)S. Suis 2型毒力相關(guān)基因表達(dá)以及調(diào)控細(xì)菌致病性等方面發(fā)揮著重要的作用。前期研究結(jié)果表明，TCSTS CovR是一個(gè)重要的全局性反應(yīng)調(diào)節(jié)因子，對細(xì)菌的致病性具有負(fù)調(diào)控作用。在此基礎(chǔ)上，本研究以S. Suis 2中國強(qiáng)毒株

2、05ZYH33的基因組為模板，克隆表達(dá)了CovR，生物信息學(xué)分析顯示，它具有典型的反應(yīng)調(diào)控因子的結(jié)構(gòu)特征，在進(jìn)化上較為保守。PCR分析表明，在豬鏈球菌的35個(gè)血清型參考菌株中，covR基因普遍存在除血清20的所有血清型中；通過基因工程的方法，將covR基因分別克隆入pET32a和pQE30 兩個(gè)表達(dá)載體后，在大腸桿菌中進(jìn)行了原核表達(dá)，His親和層析柱純化獲得CovR重組蛋白；以重組的 CovR 作為免疫原，免疫新西蘭兔制備了高效價(jià)的兔抗

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