IFN-λ1對(duì)HBV相關(guān)性肝癌細(xì)胞凋亡的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)研究.pdf

1、廣東醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文IFNλ1對(duì)HBV相關(guān)性肝癌細(xì)胞凋亡的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)研究姓名：馮麗光申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（普通外科）指導(dǎo)教師：劉維藩20080501IFN一：LI對(duì)HBV相關(guān)性肝癌細(xì)胞凋亡的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)研究摘要【目的】以轉(zhuǎn)染HBV全基因組并穩(wěn)定分泌HBsAg和HBeAg病毒抗原的HepG2215肝癌細(xì)胞系為細(xì)胞模型，探索IFNL1對(duì)HBV相關(guān)性肝癌細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)效應(yīng)?！痉椒ā?采用人HepG2215肝癌細(xì)胞系傳代培養(yǎng)技術(shù)，

2、完成人HepG2215肝癌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。2HBsAg和HBeAgELISA檢測(cè)試劑盒測(cè)定IFN九1作用0，6，12，24h后，HBV病毒顆粒的分泌表達(dá)水平。3MTT法檢測(cè)IFN九1對(duì)不同劑量新型凋亡配體TRAIL與TWEAK的生長(zhǎng)抑制影響效應(yīng)。4流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)IFNL1作用后HepG2215肝癌細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的變化?！窘Y(jié)果】1人HepG2215肝癌細(xì)胞體外培養(yǎng)成功，細(xì)胞狀態(tài)良好，呈貼壁性生長(zhǎng)。2ELISA結(jié)果表明，IFN九l(濃度

3、為200ng／m1)作用后在不同時(shí)間點(diǎn)HepG2215細(xì)胞HBsAg和HBeAg檢測(cè)的A值均有明顯下降(PO01)，其中HBeAg表達(dá)水平下調(diào)幅度更大。3Mn法結(jié)果表明，TRAIL與TWEAK(濃度為0ng／ml“一10rtg／m1)對(duì)HepG2215細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制具有劑量依賴性，且IFN九l與TRAIL和TWEA—K有協(xié)同效應(yīng)，能增強(qiáng)二者抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用(P001)。4流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，各作用組細(xì)胞凋亡率明顯升高，并出現(xiàn)凋亡峰