廣州地區(qū)獻血人群人類T淋巴細胞白血病病毒感染情況的調(diào)查及其與安全輸血關系的研究.pdf

1、【目的】 在獻血者常規(guī)篩查工作的基礎上，對獻血者進行人類T淋巴細胞白血病病毒Ⅰ型或Ⅱ型(HTLV- Ⅰ/Ⅱ)抗體檢測，同時追蹤調(diào)查受血者輸血前后HTLV感染情況，以了解廣州地區(qū)獻血人群HTLV-Ⅰ/Ⅱ感染情況和輸血傳播HTLV的風險度，對用蛋白印跡法(WB)檢測陽性者用PCR法進行擴增，以測定HTLV基因序列，比較廣州地區(qū)HTLV的基因序列與其他代表株的同源性，為探討HTLV與安全輸血的關系和是否對獻血者進行HTLV-Ⅰ/Ⅱ檢測

2、作為常規(guī)檢測項目提供重要的參考數(shù)據(jù)，為預防輸血傳播疾病提供重要依據(jù)。 【方法】 1．采?。篍LISA法檢測廣州血液中心9000例無償獻血者HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體。 2．對200名受血者進行HTLV Ⅰ/Ⅱ抗體檢測，再平均分成兩組，第一組輸注已經(jīng)HTLV/II抗體篩查的血液，第二組輸注未經(jīng)HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體篩查的血液，1個月后采取ELISA法檢測兩組受血者輸血后HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體。 3．HTLV- Ⅰ/Ⅱ

3、抗體ELISA法檢測陽性者用原試劑進行雙孔復試，雙孔復試陽性者用蛋白印跡法(WB)進行確證。 4．WB確證陽性者重新采集樣本5ml，EDTA抗凝，加入Ficoll-Hypaque溶液分離淋巴細胞。 5．分離后的淋巴細胞采用TakaRa公司的DNA抽取試劑盒抽取HTLV-Ⅰ前病毒DNA。 6．設計合成兩對引物(env區(qū)和LTR區(qū))。 7．對2例陽性標本進行PCR擴增。 8．應用測序儀對PCR陽性產(chǎn)物

4、進行DNA測序。 【結果】 1．9000例無償獻血者標本有10例HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體ELISA初篩呈陽性反應，再用原試劑進行雙孔復試只有2例陽性，陽性率為0.02％(2/9000)。 2．200名受血者輸血前后HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗體均為陰性。 3．這2例陽性標本用WB進行確證，兩者均為HTLV-Ⅰ型血清反應陽性。 4．2例陽性標本PCR檢測均在720bp(env區(qū))和501bp(LTR 區(qū))處出現(xiàn)反

5、應帶。 5．測序結果：兩例陽性標本與HTLV-Ⅰ型WHP代表株同源性分別為： 標本1:env區(qū)99.3％：LTR區(qū)99.0％。 標本2:env區(qū)99.4％：LTR區(qū)99.2％。 【結論】 1．廣州地區(qū)獻血人群HTLV感染率尚處于一個較低的水平。 2．200名受血者未出現(xiàn)因輸血而感染HTLV的情況，說明廣州地區(qū)通過輸血傳播HTLV的風險還處于較低的水平。 3．廣州地區(qū)獻血人群2例陽性