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文檔簡介
1、南開大學碩士學位論文沉默STAT4基因對小鼠淋巴瘤細胞蛋白質表達譜的影響姓名:魏曉麗申請學位級別:碩士專業(yè):生物醫(yī)學工程指導教師:王悅20090501AbstractAbstractBackground:Thesignaltransducersandactivatorsoftranscription(STATs)havediversebiologicalfunctionsandareinvolvedincelldifferentiati
2、onproliferationdevelopment,apoptosisandinflammationSeveralconstitutivelyactivatedSTATshavebeenobservedinawidevarietyofhumancancereelllinesandprimarytumorcells,includingbloodmalignanciesandsolidneoplasiasRegulatoryT(Treg)
3、cellsplaycriticalrolesinpreventingautoimmunediseases;theymightinhibitantitumorimmunityandpromotetumorgrowthOurpreviousfindingssuggestthatthesupematantfromSTAT4一silencedtumorcellcultureCansignificantlyincreasetheratioofCD
4、4CD25Foxp3regulatoryTcellsamongspleniccellsinvitro,whencomparedtothatfromnormaltumorcellcultureInthepresentstudyweinvestigatedtheeffectofSTAT4genesilencingontheexpressionprofileofproteinsinEL4cellsMethods:Celllinesshowin
5、ghighlevelexpressionofSTAT4genewasfirstlyscreenedSTAT4geneissilencedbysiRNA,andtheexpressionsoflL2、TGF13andIL一10weremeasuredbyRealtimePCRandWesternblotSELDITOFMSandtwodimensionalelectrophoresiswereconductedtoexaminethedi
6、fferenceofexpressionprofileofproteinsbetweennormalandSTAT4silencedEL4cellsResults:ThemouselymphomacelllineEL一4expresshighlevelofSTAT4SilencingofSTAT4bysiRNAdidnotchangetheexpressionlevelsoflL一2、TGF13andIL一10inEL4cellsHow
7、everadifferentexpressionprofileformultipleproteinswasobservedinthosecellsafterSTAT4silencingTheresultofSELDITOFMSexhibitsthattheproteinwithm/zof3120,3259,3404,3606,5096,6082,8590,12335、13578ischangedtremendousAndtwo—dime
8、nsionalelectrophoresisshowsthatthere20proteinchangedbetweenSTAT4silencedgroupandthecontroloneConclusion:STAT4silencingbysiRNAcouldchangethesecretionofmultipleproteinsintumorcellsAndtheproteinswhichhasbeenchangedmayinclud
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