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文檔簡介
1、研究背景:氧化應激在高血壓、糖尿病、高脂血癥等引起的動脈粥樣硬化(AS)的發(fā)病機制中起重要作用。氧化應激是指活性氧(ROS)的生成速率大于清除速率而在體內(nèi)蓄積的狀態(tài),過量的R-OS會造成DNA、RNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)不可逆損害,引起血管壁的氧化性損傷,表現(xiàn)為內(nèi)皮細胞功能和結(jié)構(gòu)障礙、單核/巨噬細胞遷移、平滑肌細胞(SMC)和成纖維細胞增生、血管重構(gòu)、細胞外基質(zhì)降解等,最終發(fā)展為動脈粥樣硬化。體內(nèi)有多種酶參與了ROS的生成,其中NADPH氧化
2、酶(NADPH Oxidase)目前被認為是血管內(nèi)生成ROS的主要酶體{3,4],gp91phox(即NOX2)是NADPH氧化酶位于胞膜的亞基,NOX4是NOX2的同源物。因此,干預NOX的研究對防治AS疾病具有重要意義。近幾年大量研究已經(jīng)證實,銀杏葉提取物(GBE)可通過多種作用機制抑制AS的發(fā)生與發(fā)展,銀杏黃酮和萜內(nèi)酯是其主要有效成分,其中黃酮多以黃酮糖苷的形式存在。銀杏黃酮苷元(GFA)是黃酮糖苷經(jīng)酸水解-重結(jié)晶法去除糖鏈后獲得
3、的新型銀杏葉提取物。本研究將兩種銀杏葉提取物干預兔動脈粥樣硬化模型,對兩者在抗動脈粥樣硬化的作用進行比較,從抗氧化方面初步探討其抗動脈粥樣硬化的藥物作用機理。
目的:觀察普通銀杏葉提取物(GBE)和新型銀杏葉提取物—銀杏黃酮苷元(GFA)對兔頸動脈粥樣硬化及NOX2和NOX4蛋白和mRNA表達的影響。
方法:選取健康雄性新西蘭大白兔40只,體重2.0~2.5 kg,隨機分為5組:對照組(n=6)、假手術組(n=7)、
4、動脈粥樣硬化模型組(AS組,n=7)、銀杏黃酮苷元組(GFA組,n=10,GFA25mg/kg·d)、銀杏葉提取物GBE組(GBE組,n=10,GBE100mg/kg·d)。對照組喂予普通飼料,假手術組喂予高脂飼料+結(jié)扎左頸外動脈,其余3組均予高脂飼料聯(lián)合內(nèi)膜球囊損傷建立頸動脈粥樣硬化模型,藥物干預四周后,抽血測定各組甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平;病理切片HE
5、染色觀察其結(jié)構(gòu)變化、測定內(nèi)膜面積、內(nèi)膜/中膜面積;透射電鏡觀察亞微結(jié)構(gòu);免疫組織化學法檢測各組NOX2和NOX4蛋白的表達;實時熒光定量(Real-time PCR)檢測各組NOX2和NOX4的mRNA表達。
結(jié)果:
1.與AS組相比,假手術組、GFA組和GBE組TC、TG及LDL-C水平無明顯差異。
2.高脂飼料聯(lián)合球囊損傷可在損傷側(cè)動脈造成典型的動脈粥樣硬化病變,與AS組相比,GFA組和GBE組損傷側(cè)頸
6、總動脈病理組織改變減輕,內(nèi)膜面積及內(nèi)膜/中膜面積明顯減少;與 GBE組相比,GFA組動脈病理組織改變減輕,內(nèi)膜面積和內(nèi)膜/中膜面積比減少。
3.與對照組相比,AS組、GFA組和GBE組NOX2及NOX4蛋白表達明顯增加;與AS組相比,GFA組和GBE組NOX2及NOX4蛋白表達明顯減少;與GBE組相比,GFA組NOX2及NOX4蛋白表達減少。
4.與對照組相比,AS組、假手術組、GFA組和GBE組NOX2及NOX4m
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