骨髓基質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)分化及其與心肌細(xì)胞之間相互作用的研究.pdf

1、心肌細(xì)胞具有多種特異基因的表達(dá),通過RT-PCR和免疫組化方法檢測(cè)心臟特異的ANP、α-MHC、和肌鈣蛋白的表達(dá)可以鑒定骨髓基質(zhì)細(xì)胞向心肌分化的能力,還可應(yīng)用透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的特征.用細(xì)胞共培養(yǎng)方法觀察兩種細(xì)胞之間的相互作用,觀察心肌細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞直接接觸共培養(yǎng)后,骨髓基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)肌鈣蛋白的情況;同時(shí)也觀察了將心肌細(xì)胞與骨髓基質(zhì)細(xì)胞用半透膜隔開共培養(yǎng)時(shí),骨髓基質(zhì)細(xì)胞旁分泌作用對(duì)缺氧所致心肌細(xì)胞損傷狀況的影響.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,骨

2、髓基質(zhì)細(xì)胞5-氮胞苷體外誘導(dǎo)后2周,肌鈣蛋白染色陽性率增加,蛤理它們還沒有表達(dá)心臟特異的ANP和α-MHC基因,細(xì)胞內(nèi)沒有找到肌絲和肌小節(jié)結(jié)構(gòu);共培養(yǎng)心肌細(xì)胞沒有明顯改變骨髓基質(zhì)細(xì)胞肌鈣蛋白的表達(dá)情況,它對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞沒有明顯的誘導(dǎo)分化作用;骨髓基質(zhì)細(xì)胞可以部分抑制缺氧誘導(dǎo)心肌細(xì)胞發(fā)生凋亡,改善心肌細(xì)胞缺氧性損傷狀況.以上結(jié)果提示,5-aza誘導(dǎo)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞肌鈣蛋白表達(dá)增加,提示它具有促心肌分化的作用,但是RT-PCR還沒有檢測(cè)到A