催產素誘導脂肪來源細胞向心肌細胞方向分化.pdf

1、研究背景：
　　 脂肪組織含有成熟脂肪細胞及脂肪組織來源干細胞(Adiposetissuederivedstemcell，簡稱ADSC)。成熟脂肪細胞在天花板培養(yǎng)下，吐脂變成具有干細胞特性的去分化脂肪細胞（DedifferentiatedFAT，簡稱DFAT）。ADSC和DFAT都已被證明具有分化為心肌樣細胞的能力。催產素（Oxytocin，簡稱OT）被證明能將胚胎腫瘤干細胞P19及P19CL6誘導分化成心肌細胞，但它能否將AD

2、SC及DFAT細胞誘導成心肌細胞尚無報道。
　　 實驗目的：
　　 檢驗OT能否將ADSC及DFAT誘導成為心肌樣細胞。
　　 實驗方法：
　　 從脂肪中分離得到ADSC及成熟脂肪細胞。通過天花板培養(yǎng)是成熟脂肪細胞去分化為DFAT。按照不同誘導的時間（1周，2周,3周）及不同濃度(10-8M，10-7M，10-6M)分組對ADSC和DFAT進行誘導培養(yǎng)。通過RT-PCR，免疫熒光及WesternBlot分

3、別在基因水平和蛋白水平檢測心肌特異性標記的表達。以人類心肌組織作為陽性對照，未加誘導的ADSC及DFAT細胞作為陰性對照。
　　 實驗結果：
　　 高濃度OT(1O-6M)造成實驗細胞大量死亡，無法進行后續(xù)試驗。10-8M及10-7M濃度的催產素誘導三周后，ADSC和DFAT在基因及蛋白水平檢測到心臟特異性標記GATA4，NKX2.5，c-TnT的表達，但是未發(fā)現(xiàn)自主搏動現(xiàn)象。相同誘導條件下，兩種細胞在基因和蛋白水平無顯