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1、背景:一般認(rèn)為,成熟心肌細(xì)胞屬于終末分化細(xì)胞,不具備再復(fù)制分化的能力.因此心肌細(xì)胞壞死后只能被纖維組織修復(fù),產(chǎn)生心室重構(gòu)、心功能衰竭.如果讓梗死的心肌長出新的心肌細(xì)胞,那么在心梗的治療方面將產(chǎn)生革命性的進(jìn)展.國內(nèi)外研究證實胚胎干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞都能在體外誘導(dǎo)分化為有功能的心肌細(xì)胞,同時也有很多文章都相繼報導(dǎo)了關(guān)于骨髓成體干細(xì)胞移植治療心梗的動物實驗,結(jié)果顯示這些細(xì)胞能遷移至梗死灶,并參與形成有功能的心肌組織.但是外周血單個核細(xì)胞定向分化
2、的體外實驗研究未見相關(guān)報道.因此,我們假設(shè)體外直接培養(yǎng)外周血單個核細(xì)胞,經(jīng)過5-氮雜胞苷誘導(dǎo)也能夠向心肌細(xì)胞方向分化.目的:該研究從人外周血中分離出單個核細(xì)胞,直接體外培養(yǎng)并應(yīng)用5-氮雜胞苷誘導(dǎo)其分化.旨在探討外周血中的單個核細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)誘導(dǎo)后是否具有心肌細(xì)胞的特征,同時又具有干細(xì)胞的特征;試圖說明誘導(dǎo)后的單個核細(xì)胞能夠向心肌細(xì)胞方向分化.結(jié)論:在實驗中我們觀察到,培養(yǎng)所得貼壁細(xì)胞從在大體形態(tài)方面來看,大多呈紡錘形,部分成球狀或者桿狀外
3、形,與文獻(xiàn)報道骨髓干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化過程中的細(xì)胞形態(tài)類似.從免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果來看,這些細(xì)胞表達(dá)肌球蛋白、α-肌節(jié)肌動蛋白、結(jié)蛋白和肌鈣蛋白T這些構(gòu)成心肌細(xì)胞骨架的主要蛋白.從RT-PCR結(jié)果來看,這些細(xì)胞也已經(jīng)有心肌細(xì)胞α-MHC和β-MHC的基因表達(dá).從流式細(xì)胞計數(shù)分析結(jié)果來看,經(jīng)5-氮雜胞苷誘導(dǎo)分化后的單個核細(xì)胞CD34陽性或AC133陽性率為53.04±5.60﹪;肌動蛋白陽性率為42.70±11.73﹪.這些培養(yǎng)誘導(dǎo)后的單
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