大鼠心肌缺血后心臟β3腎上腺素能受體表達的改變.pdf

1、背景:β3腎上腺素能受體的基因在1989年就被成功克隆,早期研究發(fā)現(xiàn)β3腎上腺素能受體主要分布在脂肪組織。Gauthier等人在后來的研究中用PCR方法檢測到心臟有β3腎上腺素能受體mRNA存在。藥理學(xué)研究提示大鼠心肌中沒有β3腎上腺素能受體蛋白表達,然而,Dincer等人的研究結(jié)果表明大鼠心肌有β3腎上腺素能受體表達。β3腎上腺素能受體在大鼠心肌缺血后心臟中的表達情況存在不同意見,明確其表達對于進一步研究其在心血管系統(tǒng)中的作用有著重要

2、的意義。
　　目的:研究心肌缺血后β3腎上腺素能受體在心臟中表達、分布改變的情況。
　　方法:(1)模型建立和取材:開胸分離心包膜,在肺動脈圓錐與左心耳之間結(jié)扎血管,建立大鼠心肌缺血動物模型。術(shù)后8周取材,分離左心室,沿心臟短軸將左室橫切為兩半,一半用來切取厚片(包括有缺血區(qū)和非缺血區(qū)),整塊厚片固定后石蠟包埋,另一半冷藏備用。
　　(2)超聲心動圖和血流動力學(xué)方法檢測手術(shù)后大鼠的心功能:氯胺酮麻醉,應(yīng)用二維超聲,檢測

3、大鼠心臟的LVPW,IVS,LVIDd,LVIDs,左室長軸,左室短軸,短軸縮短率、射血分數(shù)等指標(biāo);通過BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)監(jiān)測HR、SP、DP、AP、LVDP、LVSP、LVAP、LVEDP、+dp/dt max、-dp/dt max等血流動力學(xué)指標(biāo)。
　　(3)β3腎上腺素能受體的檢測:HE染色觀測心肌缺血后心臟組織的鏡下表現(xiàn),應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測β3腎上腺素能受體在慢性缺血后心臟中的表達、含量及其分布的情況,運

4、用western blot方法檢測慢性心肌缺血后心臟β3腎上腺素能受體蛋白表達的改變。
　　結(jié)果:(1)利用大鼠構(gòu)建慢性心肌缺血動物模型,心肌組織大體標(biāo)本肉眼觀察可見到明顯的瘢痕形成;石蠟切片,蘇木素-伊紅染色后鏡下可以看到典型的變性、纖維化等缺血后的改變。
　　(2)超聲結(jié)果提示只有左室長軸/短軸的比例值在兩組間比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義。血流動力學(xué)檢測結(jié)果提示,左心室舒張壓、左心室終末舒張壓升高,兩組比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義。

5、左心室內(nèi)壓最大上升速率、左心室內(nèi)壓最大下降速率降低,兩組比較差異有高度統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3)免疫組化檢測后我們看到心肌細胞膜和細胞漿中均有β3腎上腺素能受體蛋白表達,尤其是那些免于壞死纖維化的心肌細胞上表達更強,代償肥大的心肌細胞中也有β3受體表達。心肌組織中小血管內(nèi)皮上也有β3腎上腺素能受體蛋白表達。Western blot結(jié)果顯示β3腎上腺素能受體在缺血后大鼠心肌組織中表達明顯上調(diào)。
　　結(jié)論:(1)β3受體在長時間慢