錦燈籠的活性成分及質(zhì)量評價研究.pdf

1、錦燈籠為茄科酸漿屬植物PhysalisalkekengiL．var．franchetii(Mast．)Makino，具有清熱解毒，利咽，化痰，利尿等功效，在我國許多地區(qū)都有分布，是常用的清熱解毒藥，在臨床上有很好的療效。但錦燈籠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)目前尚不完善。 本文在綜述了酸漿屬植物化學(xué)成分和錦燈籠藥理活性研究的基礎(chǔ)上，運用現(xiàn)代色譜分離技術(shù)對錦燈籠的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離，并對其中的酸漿苦味素類成分進(jìn)行了體外抗腫瘤活性和構(gòu)效關(guān)系的研究

2、。在此基礎(chǔ)上，采用HPLC法同時測定了錦燈籠中2種酸漿苦味素類主要成分的含量；同時研究了酸漿苦味素D單體在錦燈籠藥材中的穩(wěn)定性。 1、錦燈籠化學(xué)成分研究利用多種色譜分離技術(shù)，從錦燈籠宿萼的乙醇提取物中共分離得到37個化合物，經(jīng)理化和光譜數(shù)據(jù)鑒定出其中31個化合物。其中酸漿苦味素類9個，黃酮類10個，酚類5個，苯丙素類3個，其他類型的化合物4個。在已鑒定的31個化合物中，有1個新化合物，即5α-羥基-25，27-二氫-4，7-二去

3、氫-7-脫氧新酸漿苦味素A(5α-hydroxy-25，27-dihydro-4，7-didehydro-7-deoxyneophysalinA)，11個為酸漿屬內(nèi)首次分離得到，1個為種內(nèi)首次分得。 對從錦燈籠中分離得到的酸漿苦味素類化合物進(jìn)行了體外抗腫瘤活性研究，結(jié)果顯示：酸漿苦味素類化合物對人肝癌細(xì)胞系Bel7402具有一定的生長抑制作用。其中，化合物PA-9對人肝癌細(xì)胞系Bel7402的抑制率最高，化合物PA-12最低。但

4、是化合物PA-9對人肝正常細(xì)胞系LO-2的細(xì)胞毒性也較大。 利用MTT法，通過用人前列腺癌細(xì)胞LNCAP，PC-3進(jìn)行測試，發(fā)現(xiàn)從錦燈籠中分離得到的1個新化合物在不同濃度下都具有細(xì)胞生長抑制作用，IC50值分別為：5.266，0.7285μgml-1。 2、錦燈籠的質(zhì)量評價研究建立了HPLC-DAD法同時測定錦燈籠中2種酸漿苦味素類成分含量的方法，并且測定了20批錦燈籠藥材、4批苦蘵、1批天泡果，以及錦燈籠藥材不同部位、

5、苦蘵藥材不同部位、天泡果藥材不同部位和錦燈籠鮮果及干果中2種酸漿苦味素的含量。實驗結(jié)果表明：錦燈籠藥材中酸漿苦味素D是主要的酸漿苦味素類成分，20批錦燈籠藥材中酸漿苦味素D的平均含量為2.025mg/g(即0.202％)，該成分可認(rèn)定是錦燈籠的特征性成分，因此建議藥典中應(yīng)該相應(yīng)的以這種成分為指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)量控制，是比較合理的；苦蘵中酸漿苦味素A為主要成分，天泡果中未檢出這2種成分。錦燈籠不同部位，宿萼中這2種成分的含量最高；整株植物中，酸漿

6、苦味素D的含量最高，進(jìn)一步說明錦燈籠中酸漿苦味素D為主要的酸漿苦味素類成分?？嗵u藥材中僅檢出酸漿苦味素A，且果實和宿萼中的含量最高；天泡果藥材中2種酸漿苦味素均未被檢出。錦燈籠鮮果中酸漿苦味素D的含量略高于干果。 3、錦燈籠化學(xué)成分的穩(wěn)定性研究采用化學(xué)動力學(xué)方法研究了溫度、pH值和光照等因素對酸漿苦味素D的化學(xué)穩(wěn)定性的影響。實驗結(jié)果表明，酸漿苦味素D在酸性、中性、弱堿性條件中均較為穩(wěn)定，而隨著pH值的增大，t1/2驟然減小，酸漿

7、苦味素D的降解速度加快，即其在強(qiáng)堿性條件下很不穩(wěn)定。在加熱試驗中，根據(jù)阿累尼烏斯經(jīng)驗公式計算得到酸漿苦味素D的活化能>100kJ·mol-1，說明酸漿苦味素D在12小時內(nèi)幾乎不受到溫度的影響。酸漿苦味素D在自然光中的半衰期要小于在紫外光照射下，說明酸漿苦味素D在自然光照射下的降解速度更快，且不適宜長時間光照。因此，建議酸漿苦味素D對照品應(yīng)保存在避光的環(huán)境下，對照品溶液應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。 同時對錦燈籠藥材中酸漿苦味素D的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究