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文檔簡(jiǎn)介
1、本文研究克隆了人Persephin基因,構(gòu)建重組Persephin腺病毒,探討Persephin保護(hù)神經(jīng)干細(xì)胞拮抗神經(jīng)毒素及體外誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化的作用,并觀察persephin轉(zhuǎn)基因神經(jīng)干細(xì)胞移植治療PD的作用?! ”疚挠肦T-PCR法克隆人PersephincDNA,構(gòu)建重組Persephin腺病毒載體,并純化濃縮以獲得高滴度可供轉(zhuǎn)染的病毒,為下一步開(kāi)展關(guān)于Persephin的功能研究提供基礎(chǔ)。 本文根據(jù)PersephincD
2、NA序列設(shè)計(jì)特異引物,上下游引物的5’端分別引入SalI、XhoI酶切位點(diǎn)及保護(hù)堿基,高保真Taq酶作用下用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)與同樣酶切回收的pAdTrack-CMV連接成pAdTrack-CMV-Persephin,將重組質(zhì)粒pAdTrack-CMV-Persephin與骨架質(zhì)粒pAdEasy-1共轉(zhuǎn)染大腸桿菌BJ5183,獲得重組腺病毒質(zhì)粒。 本文揭示了Persephin轉(zhuǎn)基因神經(jīng)干細(xì)胞移植到PD模型腦內(nèi),可分化為多巴胺分泌細(xì)
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