人胚神經(jīng)干細胞及骨髓基質(zhì)細胞移植治療帕金森病恒河猴模型的實驗研究.pdf

1、人胚中腦神經(jīng)干細胞及骨髓基質(zhì)細胞移植治療恒河猴帕金森病模型的實驗研究.第一部分人胚神經(jīng)干細胞與骨髓基質(zhì)細胞的培養(yǎng)及定向誘導(dǎo)分化.目的：分離來自人胚紋狀體、海馬、額葉、中腦的神經(jīng)干細胞及四肢管狀骨的骨髓基質(zhì)細胞并純化，建立共培養(yǎng)系統(tǒng)誘導(dǎo)神經(jīng)干細胞的DA能神經(jīng)元分化，根據(jù)誘導(dǎo)率來篩選合適的恒河猴帕金森病的移植治療移植供體.1.中腦神經(jīng)干細胞由于其本身所具有的區(qū)域特異性生物學(xué)特征較其他來源的神經(jīng)干細胞更易向DA能神經(jīng)元分化.2.骨髓基質(zhì)細胞能

2、提高紋狀體、海馬、額葉中腦神經(jīng)干細胞的神經(jīng)元分化率，同時能夠誘導(dǎo)除額葉神經(jīng)干細胞以外的神經(jīng)干細胞定向分化為DA能神經(jīng)元，尤以中腦神經(jīng)干細胞的誘導(dǎo)作用最強.3.共培養(yǎng)系統(tǒng)可能誘發(fā)了骨髓基質(zhì)細胞與神經(jīng)干細胞之間的自分泌/旁分泌作用，從而導(dǎo)致了DA能神經(jīng)元的誘導(dǎo)分化.4.中腦神經(jīng)干細胞可能成為移植帕金森病恒河猴模型最合適的移植供體.第二部分立體定向黑質(zhì)毀損偏側(cè)帕金森病恒河猴模型的制作.目的：建立立體定向手術(shù)下6-OHDA單側(cè)黑質(zhì)毀損方法制作偏

3、側(cè)帕金森病恒河猴模型.1.立體定向技術(shù)下6-OHDA單側(cè)恒河猴黑質(zhì)毀損方法能夠成功的制作符合人類病理特征的帕金森病模型.2.只有在6-OHDA黑質(zhì)毀損術(shù)后5-6個月才能準確的進行行為學(xué)及相關(guān)指標的檢測.3.SPECT是評價模型制作成功與否的客觀手段.第三部分人胚骨髓基質(zhì)細胞及中腦神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病恒河猴模型的實驗研究.目的：進行人胚骨髓基質(zhì)細胞及前期誘導(dǎo)的中腦神經(jīng)干細胞移植治療帕金森病恒河猴模型，檢測中腦神經(jīng)干細胞及骨髓基質(zhì)細胞

4、移植后在體內(nèi)的DA能神經(jīng)元分化率并評價兩種供體移植后的功能.1.中腦神經(jīng)干細胞移植組恒河猴癥狀明顯改善，而骨髓基質(zhì)細胞移植組癥狀無明顯改善，進一步的分析表明中腦神經(jīng)干細胞分化出的DA能神經(jīng)元雖然分化率較骨髓基質(zhì)細胞低但具備明確的神經(jīng)遞質(zhì)類神經(jīng)元功能，而骨髓基質(zhì)細胞分化出的TH陽性細胞比率雖高但并不具備DA能神經(jīng)元功能，其分化出的TH陽性細胞只能稱之為神經(jīng)元樣細胞，具體細胞類型尚不明確.2.在帕金森病的神經(jīng)干細胞移植供體選擇中我們認為中腦