缺血后處理對深低溫停循環(huán)大鼠腦保護作用的實驗研究.pdf

1、[研究背景]
　　 深低溫停循環(huán)(DHCA,deep hypothermic circulatory arrest)是心血管外科手術(shù)中一項重要的保障技術(shù),在心臟外科尤其是主動脈外科及小兒復(fù)雜先天性心臟病手術(shù)中有廣泛的應(yīng)用。自從這一技術(shù)被應(yīng)用到臨床上,復(fù)雜的心血管疾病的手術(shù)安全性和療效顯著改善。但是在臨床廣泛應(yīng)用的過程中,DHCA手術(shù)由于存在手術(shù)時間長、損傷大、全腦缺血再灌注損傷或低流量灌注導(dǎo)致的缺血缺氧等因素,術(shù)后腦部并發(fā)癥發(fā)生

2、率仍較高,如何有效預(yù)防DHCA術(shù)后的腦損傷成為近年來的研究熱點。
　　 缺血后處理(ischemia postconditioning,I-postC)是新近發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性保護現(xiàn)象,是指在一個持續(xù)較長時間的缺血期后,在再灌注前交替實施短暫的再灌注/缺血處理,其后恢復(fù)常規(guī)灌注,可以減輕再灌注損傷,從而達到組織器官的保護作用。作為一種全新的對抗缺血再灌注損傷的措施,目前已有研究表明其可以減少心、腦、肝、腎、脊髓等器官或組織的缺血再

3、灌注損傷,進而減少其功能的障礙,起到相應(yīng)的保護作用。近期許多研究證明缺血后處理可通過多種機制減輕炎癥反應(yīng)和改善氧自由基代謝,有效地減少腦組織神經(jīng)元凋亡、保護細胞功能。同時,已有大量研究表明:全腦缺血-再灌注損傷主要與氧化應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)及細胞凋亡等有關(guān)。神經(jīng)細胞凋亡是腦缺血-再灌注損傷的重要環(huán)節(jié)。
　　 由于缺血后處理具有技術(shù)簡單、實施方便、可操作性強等優(yōu)點,因此,將I-postC應(yīng)用于DHCA術(shù)后腦保護有良好的應(yīng)用前景,值得

4、深入研究。
　　 [目的]
　　 為探討缺血后處理對DHCA大鼠的腦保護作用,通過建立DHCA大鼠腦保護模型,檢測大鼠腦組織勻漿相關(guān)指標,觀察大鼠腦組織超微結(jié)構(gòu)及神經(jīng)元凋亡的情況,分析缺血后處理在DHCA大鼠腦保護作用中可能機制。
　　 [材料和方法]
　　 健康雄性清潔級SD大鼠60只,隨機分為5組:假手術(shù)組和DHCA組,缺血后處理(IPost)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組。采用改良的四血管法制作DHCA大鼠全腦缺

5、血模型。造模成功后,假手術(shù)組只暴露而不電凝及夾閉血管。DHCA組阻斷45min,開放后不做任何處理。IPost Ⅰ組:在開放時反復(fù)進行3個循環(huán)的開放15s/阻斷15s,然后全面開放。IPost Ⅱ組:在開放時反復(fù)進行3個循環(huán)的開放30s/阻斷30s,然后全面開放。IPost Ⅲ組:在開放時反復(fù)進行3個循環(huán)的開放60s/阻斷15s,然后全面開放。
　　 于再灌注24小時,在各組中隨機取8只大鼠,麻醉后斷頭取腦,制作腦組織勻漿,檢測

6、炎癥因子TNF-α、IL-1、IL-6、SOD活性及腦組織MDA含量；各組中余下4只制作腦組織病理切片,光鏡、電鏡觀察大鼠腦海馬組織病理形態(tài)及其超微結(jié)構(gòu)變化；TUNEL法檢測大鼠腦海馬神經(jīng)細胞的凋亡。
　　 [結(jié)果]
　　 早期缺血后處理Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1、IL-6較DHCA組明顯下降,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01),IPost Ⅲ組炎癥因子與DHCA組相比無統(tǒng)計學差異(P>

7、0.05)。與DHCA組相比,IPost Ⅰ組腦組織SOD含量升高(P<0.01),IPost Ⅱ組升高(P<0.05)。IPost Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織MDA含量較DHCA組明顯下降,IPost Ⅲ組再灌注24小時大鼠鼠腦組織中SOD、MPO、MDA的表達與DHCA組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。病理學結(jié)果顯示:早期缺血后處理的IPost Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織破壞和細胞損傷程度明顯低于DHCA組,IPost Ⅲ組與DHCA組相比則