缺血后處理對深低溫停循環(huán)大鼠腦保護作用的實驗研究.pdf

1、[研究背景]
　　 深低溫停循環(huán)(DHCA,deep hypothermic circulatory arrest)是心血管外科手術中一項重要的保障技術,在心臟外科尤其是主動脈外科及小兒復雜先天性心臟病手術中有廣泛的應用。自從這一技術被應用到臨床上,復雜的心血管疾病的手術安全性和療效顯著改善。但是在臨床廣泛應用的過程中,DHCA手術由于存在手術時間長、損傷大、全腦缺血再灌注損傷或低流量灌注導致的缺血缺氧等因素,術后腦部并發(fā)癥發(fā)生

2、率仍較高,如何有效預防DHCA術后的腦損傷成為近年來的研究熱點。
　　 缺血后處理(ischemia postconditioning,I-postC)是新近發(fā)現(xiàn)的一種內源性保護現(xiàn)象,是指在一個持續(xù)較長時間的缺血期后,在再灌注前交替實施短暫的再灌注/缺血處理,其后恢復常規(guī)灌注,可以減輕再灌注損傷,從而達到組織器官的保護作用。作為一種全新的對抗缺血再灌注損傷的措施,目前已有研究表明其可以減少心、腦、肝、腎、脊髓等器官或組織的缺血再

3、灌注損傷,進而減少其功能的障礙,起到相應的保護作用。近期許多研究證明缺血后處理可通過多種機制減輕炎癥反應和改善氧自由基代謝,有效地減少腦組織神經元凋亡、保護細胞功能。同時,已有大量研究表明:全腦缺血-再灌注損傷主要與氧化應激反應、炎癥反應及細胞凋亡等有關。神經細胞凋亡是腦缺血-再灌注損傷的重要環(huán)節(jié)。
　　 由于缺血后處理具有技術簡單、實施方便、可操作性強等優(yōu)點,因此,將I-postC應用于DHCA術后腦保護有良好的應用前景,值得

4、深入研究。
　　 [目的]
　　 為探討缺血后處理對DHCA大鼠的腦保護作用,通過建立DHCA大鼠腦保護模型,檢測大鼠腦組織勻漿相關指標,觀察大鼠腦組織超微結構及神經元凋亡的情況,分析缺血后處理在DHCA大鼠腦保護作用中可能機制。
　　 [材料和方法]
　　 健康雄性清潔級SD大鼠60只,隨機分為5組:假手術組和DHCA組,缺血后處理(IPost)Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組。采用改良的四血管法制作DHCA大鼠全腦缺

5、血模型。造模成功后,假手術組只暴露而不電凝及夾閉血管。DHCA組阻斷45min,開放后不做任何處理。IPost Ⅰ組:在開放時反復進行3個循環(huán)的開放15s/阻斷15s,然后全面開放。IPost Ⅱ組:在開放時反復進行3個循環(huán)的開放30s/阻斷30s,然后全面開放。IPost Ⅲ組:在開放時反復進行3個循環(huán)的開放60s/阻斷15s,然后全面開放。
　　 于再灌注24小時,在各組中隨機取8只大鼠,麻醉后斷頭取腦,制作腦組織勻漿,檢測

6、炎癥因子TNF-α、IL-1、IL-6、SOD活性及腦組織MDA含量；各組中余下4只制作腦組織病理切片,光鏡、電鏡觀察大鼠腦海馬組織病理形態(tài)及其超微結構變化；TUNEL法檢測大鼠腦海馬神經細胞的凋亡。
　　 [結果]
　　 早期缺血后處理Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織炎癥因子TNF-α、IL-1、IL-6較DHCA組明顯下降,差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01),IPost Ⅲ組炎癥因子與DHCA組相比無統(tǒng)計學差異(P>

7、0.05)。與DHCA組相比,IPost Ⅰ組腦組織SOD含量升高(P<0.01),IPost Ⅱ組升高(P<0.05)。IPost Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織MDA含量較DHCA組明顯下降,IPost Ⅲ組再灌注24小時大鼠鼠腦組織中SOD、MPO、MDA的表達與DHCA組相比無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。病理學結果顯示:早期缺血后處理的IPost Ⅰ組、Ⅱ組大鼠腦組織破壞和細胞損傷程度明顯低于DHCA組,IPost Ⅲ組與DHCA組相比則