人可溶性Flt3配體的基因工程生產、生物學活性及抗輻射作用的研究.pdf

1、 為獲得高效表達人可溶性FL(rhFL)的表達菌株，生產具有生物學功能的rhFL，并研究rhFL在機體輻射防護中的作用，我們應用畢氏酵母(Pichiapastoris)表達系統(tǒng)表達rhFL，經(jīng)分離純化后，對其體外生物學活性進行了一系列研究，并就其在體內、外的輻射防護作用及其機制進行了探索。 本文第一部分研究了rhFL的基因克隆、表達、分離及純化。應用全自動發(fā)酵裝置進行發(fā)酵，獲得30mg/L表達上清的表達蛋白，并進行了rhF

2、L的分離、純化，獲得純度達95﹪以上的重組蛋白。經(jīng)體外生物學活性測定，證實具有較好的生物學作用。 本文第二部分研究了rhFL對正常造血的作用。研究結果表明，rhFL對造血系統(tǒng)不但具有直接作用(刺激造血集落的形成和樹突狀細胞的發(fā)育)，而且具有間接作用(通過刺激造血基質細胞-內皮細胞來實現(xiàn))。 本文第三部分研究了rhFL對白血病細胞的作用。造血系統(tǒng)多種惡性腫瘤起源于造血前體細胞，這些細胞是否表達Flt3R，F(xiàn)L對其有無刺激作

3、用，這關系到FL能否用于該類患者造血功能嚴重衰竭時的治療，亦關系到FL能否用于此類患者的抗腫瘤生物治療?！　”狙芯扛鶕?jù)FL對正常NK細胞、DC的刺激作用及其在免疫系統(tǒng)造血過程中的重要功能，研究了FL對受照射外周血單個核細胞(PBMC)中淋巴細胞、NK細胞組分的影響。rhFL還可有效地協(xié)同TNFα+GM-CSF+IL-4，自受照射的PBMC中誘導產生DC。rhFL對DC的刺激增殖作用，有可能使機體在輻射后對易于侵入的各種病原菌產生有效的