不同褐藻酸糖片段及其衍生物對神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷保護(hù)作用的構(gòu)效關(guān)系研究.pdf

1、褐藻酸是由α-1，4-L-古羅糖醛酸(α-1，4-L-guluronic acid，簡稱G)和β-1，4-D-甘露糖醛酸(β-1，4-D-mannuronic acid，簡稱M)通過1→4糖苷鍵連接而成的直鏈多糖。其中聚甘露糖醛酸片段、聚古羅糖醛酸片段是其重要組成片段。褐藻酸多糖、寡糖及其衍生物具有廣泛的生物活性，如抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、神經(jīng)保護(hù)等活性。本實(shí)驗(yàn)室前期對褐藻酸抗氧化保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的活性作了系統(tǒng)的研究，發(fā)現(xiàn)其在體內(nèi)

2、外均有良好的活性。考慮到褐藻酸成分復(fù)雜，其糖元構(gòu)型、聚合度以及基團(tuán)修飾都可能影響其活性，確定其結(jié)構(gòu)與抗氧化保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的構(gòu)效關(guān)系規(guī)律，對定向藥物設(shè)計(jì)和同類藥物的研究開發(fā)具有重要意義。 本論文選取了兩種結(jié)構(gòu)不同的褐藻酸多糖并制備了其相應(yīng)的硫酸酯化衍生物，比較了構(gòu)型及取代基對抗氧化保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞活性的影響。在此基礎(chǔ)上，通過制備聚甘露糖醛酸寡糖，比較了寡糖聚合度對抗氧化保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞活性的影響。初步闡明了褐藻酸不同糖片段及其衍生物對抗氧化

3、保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞活性的構(gòu)效關(guān)系，為深入闡明褐藻酸抗老年性癡呆的作用機(jī)制，以及今后定向藥物設(shè)計(jì)和同類藥物的研究開發(fā)奠定了理論基礎(chǔ)。 一、褐藻酸系列多糖及其衍生物的制備 首先選取了以褐藻酸來源的聚甘露糖醛酸和其光學(xué)異構(gòu)體聚古羅糖醛酸，并且應(yīng)用半合成方法(氯磺酸無水反應(yīng))獲得硫酸化修飾的聚甘露糖醛酸硫酸酯(M-SO4)、聚古羅糖醛酸硫酸酯(G-SO4)，制備獲得了四種褐藻酸系列多糖及其衍生物。 利用紅外光譜對四種多糖進(jìn)行了

4、結(jié)構(gòu)鑒定，初步驗(yàn)證了聚甘露糖醛酸、聚古羅糖醛酸、聚甘露糖醛酸硫酸酯、聚古羅糖醛酸硫酸酯的結(jié)構(gòu)，指認(rèn)了其相應(yīng)的特征吸收峰。使用經(jīng)典的硫酸鋇.明膠比濁法對其含硫量進(jìn)行了定量測定，為磺化工藝的質(zhì)量控制提供了保障。 二、褐藻酸系列多糖及其衍生物對神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用 采用H2O2致PC12細(xì)胞氧化損傷的體外模型，研究了褐藻酸系列多糖及其衍生物對神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，通過計(jì)算細(xì)胞存活率評價(jià)藥物對神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)活性。通過

5、比較聚甘露糖醛酸(M)、聚古羅糖醛酸(G)、聚甘露糖醛酸硫酸酯(M-SO4)、聚古羅糖醛酸硫酸酯(G-SO4)四種多糖，發(fā)現(xiàn)了聚甘露糖醛酸(M)對神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用最強(qiáng)，而其光學(xué)異構(gòu)體聚古羅糖醛酸沒有神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用，其相應(yīng)的硫酸多糖對神經(jīng)細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用也不明顯。說明褐藻酸多糖系列的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用具有一定的結(jié)構(gòu)特異性和基團(tuán)要求。 三、褐藻酸寡糖的制備和神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)最小活性片段的確定 為了確定獲