系列殼寡糖衍生物的制備及其對神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的研究.pdf

1、近年來阿爾茨海默病的發(fā)病率逐漸升高，給社會和家庭造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)、精神負(fù)擔(dān)。但目前的臨床藥物只能延緩病情的發(fā)展，并不能徹底地治愈阿爾茨海默病，且有一定的毒副作用。因此開發(fā)低毒、高效的治療阿爾茨海默病的藥物是十分重要的。阿爾茨海默病的主要病理特征之一為神經(jīng)細(xì)胞的大量丟失，因此保護(hù)神經(jīng)元可以有效地緩解和治療阿爾茨海默病。殼寡糖是天然存在的堿性氨基寡糖，具有廣泛的生物活性。最近，許多研究表明殼寡糖具有神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用，有望開發(fā)成一種神經(jīng)保護(hù)劑

2、，用于治療阿爾茨海默病。
　　本文以酶解制備的殼寡糖混合物為起始原料，制備了三種系列的殼寡糖及其衍生物單體。首先通過凝膠柱色譜分離得到了五個(gè)殼寡糖單體:殼三糖、殼四糖、殼五糖、殼六糖和殼七糖。然后采用化學(xué)修飾的方法制備了3個(gè)全乙酰殼寡糖單體和3個(gè)N-乙酰殼寡糖單體:全乙酰殼二糖、全乙酰殼三糖、全乙酰殼四糖，N-乙酰殼二糖、N-乙酰殼三糖、N-乙酰殼四糖。采用薄層色譜法(TLC)和高效液相色譜法(HPLC)對得到的11個(gè)單體化合物進(jìn)

3、行了純度分析;并采用紅外光譜（IR）、質(zhì)譜(MS)、核磁(NMR)對化合物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證和表征。
　　利用氯化銅和谷氨酸對PC-12細(xì)胞誘導(dǎo)建立兩種神經(jīng)細(xì)胞損傷模型，在細(xì)胞水平上對不同系列的殼寡糖及其衍生物單體進(jìn)行神經(jīng)保護(hù)作用的活性篩選。結(jié)果表明，全乙?；瘹す烟侨齻€(gè)單體活性最佳，具有顯著性的保護(hù)作用，可以將細(xì)胞活力由40％提高到90％左右，并且保護(hù)作用為全乙酰四糖＞全乙酰三糖＞全乙酰二糖，且中劑量(200μg/mL)的作用效果優(yōu)于

4、低劑量(100μg/mL)和高劑量組(400μg/mL);殼寡糖樣品的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用也比較好，其中殼六糖具有一定的保護(hù)作用（與模型組相比，可將細(xì)胞活力提高16％）。
　　進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)全乙酰殼寡糖單體可以降低谷氨酸誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的堆積，減少乳酸脫氫酶(LDH)的釋放，并能夠提升線粒體膜電位(MMP)，上述研究表明全乙酰殼寡糖可能通過降低細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生，減輕氧化損傷，從而發(fā)揮神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用。
　　本論文初