黃連解毒湯對老年癡呆模型藥效學及神經細胞保護作用的研究.pdf

1、黃連解毒湯為清熱解毒的代表方劑，具有抗菌、降糖、降脂、抗氧化、神經保護等藥理作用，對許多種疾病具有一定的治療效果。本研究作為國家自然基金課題“黃連解毒湯異病同治療效原理與配伍規(guī)律基礎研究”的一部分，以黃連解毒湯對老年癡呆(AD)模型的干預作用為切入點，對黃連解毒湯及其主要藥效成分的藥效學和對神經細胞損傷保護作用進行研究，從而為該方劑“異病同治”相關理論和臨床應用提供實驗依據(jù)。本研究主要包括以下部分：
　　1黃連解毒湯治療AD的中醫(yī)

2、理論基礎：近年來中醫(yī)理論與臨床研究顯示，“毒損腦絡”是老年癡呆發(fā)生的主要病機，濁毒損傷腦時，腦竅壅塞，神機失用則發(fā)生癡呆。黃連解毒湯治療老年癡呆具有一定的臨床療效，源自該方是清熱解毒的代表方劑，解毒為其治療AD作用提供了理論基礎。
　　2黃連解毒湯及其主要藥效成分小檗堿對AD模型大鼠學習記憶障礙的干預作用：采用Aβ1-42雙側海馬CA1區(qū)注射，制備AD模型大鼠。實驗分為8組，分別為：Ⅰ組空白組，Ⅱ組假手術組，Ⅲ組模型組，Ⅳ組陽性藥

3、組(鹽酸多奈哌齊：2mg·kg-1.d-1)，Ⅴ組黃連解毒湯大劑量組(11.5g·kg-1.d-1)，Ⅵ組黃連解毒湯中劑量組(5.75g·kg-1.d-1)，Ⅶ組黃連解毒湯小劑量組(2.875g·kg-1.d-1)，Ⅷ組小檗堿組(100mg·kg-1.d-1)。應用Morris水迷宮檢測模型大鼠空間學習記憶能力。結果顯示，黃連解毒湯各給藥組體重較假手術組降低，與模型組比較無明顯差異，小檗堿組體重高于模型組，與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義

4、。水迷宮實驗結果顯示，隨著訓練時間延長，各組大鼠總游程及潛伏期逐漸降低。小劑量黃連解毒湯組與小檗堿組對AD模型學習記憶能力有一定的改善作用。
　　3黃連解毒湯及其主要成分對AD模型大鼠血清炎性因子(IL-1β，IL-6，TNF-α)及INS的影響：通過放免的方法檢測各組大鼠血清炎性因子(IL-1β，IL-6，TNF-α)及INS的變化，結果顯示，與假手術組比較，大鼠血清IL-1β含量降低；模型組及各給藥組血清IL-6含量增高，其中

5、模型組與小檗堿組增加明顯；各組大鼠血清TNF-α含量無明顯不同。血清胰島素水平檢測顯示，黃連解毒湯各劑量組及鹽酸多奈哌齊組大鼠血清INS水平高于模型組與假手術組，提示黃連解毒湯、小檗堿對學習記憶改善作用與IL-1β，IL-6及INS相關。
　　4黃連解毒湯及其主要成分對神經細胞保護作用的比較：制備H2o2，Glu損傷SH-SY5Y，Neuro-2a細胞模型，設正常對照、模型、黃連解毒湯、小檗堿、黃芩苷、巴馬汀及梔子苷組，篩選濃度為

6、7.8125，15.625，31.25，62.5，125，250，500 ug·mL-1，應用MTT法檢測藥物對損傷后細胞增殖的影響。結果顯示黃連解毒湯能夠促進SH-SY5Y細胞增殖，適當濃度的梔子苷能夠促進SH-SY5Y，Neuro-2a細胞增殖，并對H2O2，Glu損傷的SH-SY5Y細胞有保護作用，對H2O2損傷的Neuro-2a也具有保護作用。梔子苷可能為黃連解毒湯對神經細胞保護作用的有效成分。
　　綜上所述，本文從中醫(yī)基

7、礎理論分析黃連解毒湯抗AD作用的潛在原理，通過實驗觀察其對AD模型大鼠學習記憶的改善作用及作用的可能機制，并應用體外細胞模型比較黃連解毒湯及其主要成分對神經細胞保護作用。發(fā)現(xiàn)小劑量黃連解毒湯、小檗堿能夠改善擬AD大鼠空間學習記憶能力；改善作用與血清胰島素含量，炎癥因子IL-6、IL-1β含量相關。梔子苷具有對神經細胞保護的作用。本文的研究為中藥復方抗AD作用的研究提供了實驗數(shù)據(jù)，并為黃連解毒湯“異病同治”AD作用療效原理提供了實驗依據(jù)。