干擾TIGAR基因增強(qiáng)表阿霉素對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:探討干擾TIGAR基因是否能增強(qiáng)表阿霉素對(duì)HepG2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用
　　 方法:化學(xué)合成熒光標(biāo)記的TIGAR-siRNA,通過(guò)WESTERN-BLOT檢測(cè)其干擾效能；噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)計(jì)算表阿霉素(EPI)對(duì)HepG2細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50),通過(guò)Western blot測(cè)定細(xì)胞經(jīng)RNA干擾和/或表阿霉素處理后的TIGAR蛋白表達(dá)情況,利用Hoechst染色,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞經(jīng)處理后的凋亡情況。
　　

2、 結(jié)果:細(xì)胞經(jīng)RNA干擾后的Western blot顯示TIGAR-siRNA可高效干擾TIGAR蛋白表達(dá),干擾后約72小時(shí)干擾效果最佳。MTT結(jié)果分析顯示表阿霉素對(duì)HepG2細(xì)胞IC50為1.916μg/ml。Western blot結(jié)果顯示表阿霉素可增加TIGAR蛋白表達(dá),但可被TIGAR-RNAi高效干擾。Hoechst染色及流式細(xì)胞術(shù)凋亡分析結(jié)果揭示,隨EPI濃度增加,細(xì)胞凋亡增加；TIGAR-RNAi本身并不能引起明顯的細(xì)胞凋

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