DVL3 和細胞外因子β-catenin 的表達與乳腺癌細胞發(fā)展的相關性及其機制研究.pdf

1、目的：AMPK（Adenosine5’-monophosphate-activated protein kinase）即AMP依賴性蛋白激酶是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，是調節(jié)能量代謝的關鍵分子，是機體中能源系統的主要監(jiān)管機構，在細胞或組織中可以通過調節(jié)下游信號分子DVL3和β-catenin蛋白調控細胞新陳代謝和保護其免受各種外界壓力的功能。AMPK激活劑能夠通過對腫瘤細胞的生長進行抑制進而達到治療疾病的效果。但是，對于AMPK如何活

2、化和如何在癌癥中抑制癌細胞增殖的分子機制到目前仍然并不十分清楚。我們通過研究AMPK激活劑對乳腺癌細胞和組織的影響，以期闡明其作用的分子機制，為將來用于臨床治療提供可靠的理論依據。
　　方法：收集并用Western Blot和免疫組化法分析40例乳腺癌患者組織中AMP依賴性蛋白激酶下游分子DVL3和β-catenin的蛋白質表達水平與乳腺癌細胞病理特征，預后以及不同分子亞型之間的相關性。利用Western Blot法檢測了加載有D

3、VL3質?；蛘遱hRNA-DVL3的MCF-7、MDA-MB-231、T-47D乳腺癌細胞和MCF-10乳腺細胞的DVL3表達和細胞周期的變化。利用AMPK的激活劑二甲雙胍處理乳腺癌細胞通過體外劃痕實驗，Transwell法以及細胞克隆實驗檢測乳腺癌細胞的發(fā)展。構建了乳腺癌移植瘤的模式小鼠結合HE染色和Western Blot法檢測了DVL3和β-catenin的表達水平。
　　結果：乳腺癌組織中存在DVL3的過表達，并且與分型、

4、分化、淋巴結轉移和分期相關，DVL3在淋巴結轉移灶的表達明顯高于原發(fā)灶。DVL3過表達與異常表達跟乳腺癌的不良預后正相關，并可作為影響乳腺癌預后的獨立危險因素。DVL3能夠與Wnt/β-catenin信號通路作用，顯著調節(jié)癌細胞的生長。AMPK激活劑有可能抑制乳腺癌細胞的生長，減少DVL3與Wnt/β-catenin信號的表達。進一步對轉染過表達或者抑制DVL3的乳腺癌細胞進行研究，發(fā)現DLV3參與了細胞的增殖，遷移和凋亡等過程。

5、>　　AMPK激活劑是通過減少DVL3的表達和降低β-catenin水平來抑制乳腺癌細胞的生長。免疫印跡和免疫組織化學顯示DVL3與β-catenin表達水平顯著相關。過表達DVL3導致β-catenin表達水平上升和乳腺癌細胞的過度生長，這證實通過Wnt/β-catenin通路激活的DVL3與乳腺癌的發(fā)展有關。為了闡明機制，我們在體內和體外使用了AMPK活化劑確認對DVL3和β-catenin是否存在依賴關系。
　　結論：DLV