替勃龍對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力及神經(jīng)元凋亡的影響.pdf

1、目的:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是老年人常見的神經(jīng)退行性疾病,其發(fā)病機(jī)制尚未明確。有文獻(xiàn)報(bào)道AD患者的血清雌激素降低,研究發(fā)現(xiàn)雌激素在AD的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后中起到十分重要的作用。大量的人群回顧性及前瞻性研究和體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明,雌激素替代療法不僅對(duì)AD的治療有效,更重要的是能預(yù)防AD發(fā)病及推遲發(fā)病年齡。替勃龍(tibolone,7-甲基異炔諾酮)是一種甾體化合物,有弱的雌激素、弱的孕激素、非常弱的雄激素和顯

2、著的蛋白同化活性,在骨、大腦的體溫中樞和陰道表現(xiàn)為雌激素作用。本研究主要考察替勃龍對(duì)阿爾茨海默病模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力及神經(jīng)元凋亡的影響。
　　 方法:用立體定位技術(shù)對(duì)海馬CA1區(qū)微量注射Aβ25～35造成阿爾茨海默病模型;實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為4組,假手術(shù)組(sham),AD組,大劑量替勃龍組(tibolone-L)[2.5 mg/(kg·d)];小劑量替勃龍組(tibolone-S)[0.25 mg/(kg·d)],每組10只。替

3、勃龍組于建模后24 h開始給藥,每天1次,連續(xù)7 d。AD組、假手術(shù)組腹腔注射等量的生理鹽水。各組術(shù)后均單籠飼養(yǎng)至大鼠完全清醒。Morris水迷宮檢測(cè)大鼠記憶水平;甲基百里香酚藍(lán)比色法測(cè)定Ca2+含量;硝酸還原法檢測(cè)一氧化氮合酶(NOS);TUNEL染色法檢測(cè)海馬細(xì)胞凋亡。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,單因素方差分析。
　　 結(jié)果:①行為學(xué)測(cè)定:在定位航行試驗(yàn)中,模型組大鼠平均逃避潛伏期較對(duì)照組明顯延長(zhǎng)(P＜0.01

4、),大劑量用藥組大鼠平均逃避潛伏期較模型組明顯縮短(P＜0.01),但仍比對(duì)照組長(zhǎng)(P＜0.01);在空間探索試驗(yàn)中,模型組大鼠跨越原平臺(tái)位置的次數(shù)較對(duì)照組明顯減少(P＜0.01),大劑量用藥組大鼠跨越原平臺(tái)位置的次數(shù)較模型組明顯增多(P＜0.05),但仍較對(duì)照組少(P＜0.01);小劑量用藥組與模型組比較,沒有顯著性差異。②對(duì)大鼠海馬Ca2+的影響:與假AD組相比AD組大鼠海馬Ca2+含量明顯增高(P＜0.01);與AD組比較,小劑量

5、用藥組大鼠海馬Ca2+含量減少(P＜0.05),大劑量用藥組顯著減少(P＜0.01)。③對(duì)大鼠海馬NOS的影響:與假AD組相比,NOS在AD組大鼠海馬的表達(dá)明顯增高(P＜0.01);與AD組比較,小劑量用藥組大鼠海馬的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少(P＜0.05),大劑量用藥組顯著減少(P＜0.01)。④對(duì)照組大鼠海馬未見明顯神經(jīng)元損傷,可見少量增生的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,核小深染,呈圓形或卵圓形,胞質(zhì)不著色;模型組大鼠海馬區(qū)注射點(diǎn)附近可見齒狀回背側(cè)顆粒細(xì)胞帶

6、斷裂,局部神經(jīng)元大量缺失,細(xì)胞排列明顯紊亂,tunel細(xì)胞多,染色深,出現(xiàn)彌漫性膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng),神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(59.12±5.31)較假手術(shù)組(17.87±2.68)明顯增多(P＜0.01);大劑量用藥組神經(jīng)元丟失程度減輕,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)(46.63±4.47)較模型組明顯減少(P＜0.01);小劑量用藥組,有所改善,細(xì)胞排列較整齊,但是tunnel細(xì)胞數(shù),與模型組比較無明顯意義。由此可見大劑量替勃龍可明顯提高Aβ25～35所致阿爾茨海

7、默病大鼠學(xué)習(xí)記憶水平;顯著降低海馬細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)將Aβ注射入雙側(cè)海馬15 d后,大鼠學(xué)習(xí)記憶能力下降,海馬區(qū)可見彌漫性膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng),局部神經(jīng)元大量缺失,模擬了AD學(xué)習(xí)記憶障礙、炎癥反應(yīng)、神經(jīng)元受損等行為學(xué)和病理學(xué)特征。本研究表明替勃龍可明顯提高Aβ25～35所致癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶水平,能夠抑制AD大鼠海馬Ca2+含量的升高,能夠抑制NOS在AD大鼠海馬的表達(dá),顯著降低海馬細(xì)胞凋亡率。提示替勃龍對(duì)阿爾茨海默病大鼠的