基因重組NRG-1β對(duì)缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用評(píng)價(jià).pdf

1、目的：
　　 觀察神經(jīng)調(diào)節(jié)素-1β（Neuregulin-1β，NRG-1β）對(duì)大鼠大腦中動(dòng)脈缺血（MCAO）性損傷的預(yù)防和治療作用，探討MCAO的病理生理學(xué)機(jī)制及NRG-1β治療的最佳時(shí)機(jī)和神經(jīng)保護(hù)作用。
　　 方法：
　　 成年健康Wistar大鼠475只，隨機(jī)分為假手術(shù)組、對(duì)照組、預(yù)處理組、治療組。應(yīng)用線栓法建立MCAO模型，經(jīng)左頸外-頸內(nèi)動(dòng)脈單劑量注射NRG-1β干預(yù)治療。
　　 Longa法進(jìn)行

2、神經(jīng)功能學(xué)評(píng)分，干濕重法測量腦組織含水量，氯化三苯基四氮唑（TTC）
　　 染色法測定腦梗塞體積，TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡，免疫組化、免疫熒光雙標(biāo)法、免疫印跡及RT-PCR等檢測AQP-4、Erg-1、STAT-3、GFAP、MMP-9、NSE、XIAP和Smac等蛋白及其mRNA表達(dá)水平的變化。
　　 結(jié)果：
　　 ①模型建立后，對(duì)照組大鼠均出現(xiàn)神經(jīng)功能缺失癥狀，腦組織含水量和腦梗塞體積增大，NRG-1β預(yù)處理

3、及治療能明顯改善大鼠神經(jīng)功能缺損癥狀，減少腦組織含水量及腦梗死體積。
　　 ②缺血再灌注能誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞凋亡，減少抗凋亡蛋白XIAP的水平，增加凋亡蛋白Smac的表達(dá)；NRG-1β預(yù)處理能減少大鼠缺血腦組織細(xì)胞凋亡數(shù)，明顯增加抗凋亡蛋白、減少促凋亡蛋白的表達(dá)水平、均衡抗凋亡蛋白（XIAP）/促凋亡蛋白（Smac）的表達(dá)水平、促進(jìn)某些及早基因（Erg-1）的表達(dá)、有效抑制腦損傷后炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展；與對(duì)照組相比存在顯著差別（P<0.

4、05）。
　　 ③缺血后24 h內(nèi)給NRG-1β干預(yù)均能減少大鼠缺血腦組織細(xì)胞凋亡數(shù)，抑制腦損傷后炎癥反應(yīng)，尤其以缺血1 h 給藥效果最好。NRG-1β的神經(jīng)保護(hù)作用至少持續(xù)至給藥后24 h。
　　 ④隨著缺血時(shí)間的延長，對(duì)照組腦組織AQP-4、STAT-3、GFAP、MMP-9、NSE等蛋白的表達(dá)水平有不同程度的增加；NRG-1β治療在一定時(shí)間內(nèi)能增加AQP-4、STAT-3、GFAP和NSE的表達(dá)水平，減少M(fèi)MP-9

5、 蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)論：
　　 ①NRG-1β預(yù)處理能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生缺血性耐受，有效保護(hù)缺血腦組織繼發(fā)性損傷。
　　 ②NRG-1β對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷有積極的保護(hù)作用，缺血24 h內(nèi)給藥均可減輕腦損傷程度，缺血1 h 給藥可能是其最佳治療時(shí)間窗，這種神經(jīng)保護(hù)作用至少持續(xù)至給藥后24 h。
　　 ③NRG-1β的神經(jīng)保護(hù)作用可能是通過激活某些及早基因、結(jié)合并活化其特異性受體、抑制凋亡途徑中的多個(gè)環(huán)節(jié)