運動訓練與白脈軟膏對腦梗死大鼠神經(jīng)功能恢復及皮質(zhì)GAP-43和p38MAPK表達影響的實驗研究.pdf

1、目的： 缺血性腦卒中是嚴重危害人民健康的主要疾病，其直接降低了患者的生存質(zhì)量，給家庭和社會帶來了沉重的負擔。臨床研究表明，運動訓練可以顯著改善缺血性腦卒中所引起的功能障礙，提高患者的生存質(zhì)量。藏醫(yī)理論認為人體存在白脈和黑脈兩套系統(tǒng)，所謂黑脈系泛指動脈、靜脈以及整個血液循環(huán)系統(tǒng)；而所謂白脈則包括大腦、小腦、延腦、脊髓以及各種神經(jīng)?！鞍酌}軟膏”由著名藏醫(yī)藥學家貢曼貢確班達根據(jù)傳統(tǒng)藏醫(yī)藥學理論，秉承經(jīng)典巨著《四部醫(yī)典》以及諸多藏醫(yī)藥學

2、秘籍專著之精髓研制。經(jīng)過幾百年的臨床應用和觀察，發(fā)現(xiàn)本品對腦卒中等原因引起的神經(jīng)系統(tǒng)疾病有著顯著的療效，可以促進腦梗塞患者運動功能的恢復。 本研究通過建立大鼠局灶性腦缺血模型，觀察運動訓練、應用傳統(tǒng)藏藥白脈軟膏及二者聯(lián)合應用后大鼠神經(jīng)功能恢復情況，并通過免疫組織化學染色方法測定腦組織中生長相關蛋白-43(growth associated protein-43， GAP-43)和p38絲裂素活化蛋白激酶(p38mitogen a

3、ctivated protein kinase，p38MAPK)的表達變化，初步探討運動訓練、白脈軟膏及二者聯(lián)合應用對腦缺血模型大鼠行為功能的作用及其可能機制。 材料和方法： 1、大鼠大腦中動脈閉塞(middle cerebral artery occlusion， MCAO)模型的制作：選取雄性Wistar大鼠136只，個體重量150g～250 g，采用Longa線栓法制作大鼠大腦中動脈閉塞腦缺血模型，依照Longa等

4、的方法對大鼠進行神經(jīng)行為學評分，使用6分法評價大鼠腦缺血后運動及行為學缺陷，將評分為1—4分的大鼠納入研究。 2、實驗動物分組：將手術后符合入選標準的大鼠依次編號，隨機分為模型組，運動訓練干預組(簡稱運動組)，白脈軟膏藥物干預組(簡稱白脈組)，運動訓練及白脈軟膏聯(lián)合干預組(簡稱聯(lián)合治療組)，各組又分為術后1、3、7、14d四個時間點，每組每個時間點各8只大鼠，另設正常對照組8只。 3、運動訓練效果的評定：分別在術后1、3

5、、7、14d，采用Longa神經(jīng)行為學評分評價神經(jīng)功能的恢復情況。 4、大鼠腦內(nèi)GAP-43和p38MAPK的鑒定： ①GAP-43陽性細胞變化情況：采用免疫組織化學染色了解各組大鼠腦內(nèi)各時間點GAP-43陽性細胞增殖情況； ②p38MAPK陽性細胞變化情況：采用免疫組織化學染色了解各組大鼠腦內(nèi)各時間點p38MAPK陽性細胞增殖情況； 結(jié)果： 1、神經(jīng)行為學評分：造模成功后1d及3d各組動物神經(jīng)功

6、能評分無顯著性差異，治療7d和14d時白脈組和運動組以及聯(lián)合治療組神經(jīng)功能評分高于模型組，有顯著性差異(P<0．01)，白脈組和運動組神經(jīng)功能評分在各時間點均無顯著性差異，聯(lián)合治療組在14d與白脈組及運動組相比神經(jīng)功能評分高，有顯著性差異(P<0．01)。 2、GAP-43陽性細胞增殖情況：免疫組化染色顯示模型組梗死周邊區(qū)GAP-43的陽性細胞數(shù)于缺血后1d即輕度升高，第7d達到高峰，此后逐漸降低。與模型組相比，運動組、白脈組及

7、聯(lián)合治療組在7d和14d時腦缺血周邊區(qū)GAP-43陽性細胞數(shù)增高，差異有顯著性(P<0．01)。運動組與白脈組相比GAP-43陽性細胞數(shù)無顯著性差異，聯(lián)合治療組大鼠腦GAP-43陽性細胞數(shù)增多，7d和14d時與運動組及白脈組相比有顯著性差異(P<0．01)。 3、p38MAPK陽性細胞增殖情況：免疫組化染色顯示模型組大鼠腦內(nèi)梗死周邊區(qū)p38MAPK的陽性細胞數(shù)于缺血損傷后1d達高峰，隨后逐漸下降。陽性細胞主要見于缺血半球大腦皮層

8、和梗死灶周邊區(qū)。模型組p38MAPK在各時間點陽性細胞數(shù)均明顯增多，與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0．01)；運動組、白脈組及聯(lián)合治療組p38MAPK陽性細胞與模型組有相似表達規(guī)律，與模型組相比明顯降低，在7、14d時有顯著性差異(P<0．01)，聯(lián)合治療組大鼠腦p38MAPK陽性細胞數(shù)比運動組及白脈組少，在7、14d時有顯著性差異(P<0．05)。 結(jié)論： 運動訓練、白脈軟膏對局灶腦梗死大鼠神經(jīng)功能恢復均有明顯促進