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文檔簡介
1、目的:探討針刺對腦缺血大鼠健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)GAP-43表達水平的影響,及其與大鼠神經(jīng)功能恢復的關(guān)系。
方法:選用 SPF級雄性大鼠100只,將100只大鼠隨機分成:假手術(shù)組20只,造模組80只。對造模組80只大鼠進行線栓法造模,造模成功后,隨機分為模型組20只,針刺組60只,針刺組隨機分為患側(cè)針刺組20只,健側(cè)針刺組20只,雙側(cè)針刺組20只。假手術(shù)組和模型組大鼠在同等條件下飼養(yǎng),未予任何處理。然后對針刺組大鼠進行針刺治療,患側(cè)針
2、刺組以患側(cè)肩髃、曲池、合谷、三陰交、足三里、環(huán)跳為主,健側(cè)針刺組以健側(cè)的肩髃、曲池、合谷、三陰交、足三里、環(huán)跳為主,雙側(cè)針刺組對兩側(cè)肢體都進行針刺治療,穴位如上,均留針30min,其間每l0min行針1次。每天針刺1次,一個星期針刺治療6天,休息1天,一個星期為1個療程。經(jīng)過針刺治療后,選取5個時間點(術(shù)后24h、治療第7天、治療第14天、治療第21天、治療第28天)對各組實驗大鼠進行神經(jīng)功能綜合評分,評分后選取4個時間點(治療第7天、
3、治療第14天、治療第21天、治療第28天)每組取5只實驗大鼠斷頭取腦,切取健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)腦組織(前囟前4.5㎜至前囟后0.5㎜)包埋切片,進行GAP-43免疫熒光染色,觀察GAP-43表達水平。
結(jié)果:
1.各組實驗大鼠的神經(jīng)功能綜合評分
模型組和針刺組大鼠Zea-Longa評分、術(shù)后24小時評分和假手術(shù)組大鼠比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。模型組和針刺組大鼠Zea-Longa評分、術(shù)后24小時評分
4、差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),具有可比性。針刺組大鼠治療后綜合評分均優(yōu)于模型組(P<0.05)?;紓?cè)針刺組、健側(cè)針刺組及雙側(cè)針刺組治療第7天、治療第14天、治療第21天、治療第28天和術(shù)后24h比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療第7天、治療第14天、治療第21天、治療第28天,患側(cè)針刺組和健側(cè)針刺組進行組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);雙側(cè)針刺組與患側(cè)針刺組、健側(cè)針刺組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治
5、療第14天與治療第7天、治療第21天與治療第14天進行組內(nèi)比較,患側(cè)針刺組、健側(cè)針刺組及雙側(cè)針刺組差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。治療第28天與治療第21天進行組內(nèi)比較,患側(cè)針刺組和健側(cè)針刺組差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),雙側(cè)針刺組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2.各組實驗大鼠健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)GAP-43表達水平
假手術(shù)組中GAP-43紅色熒光信號強度微弱(±),可以看到少許信號散在分布于細胞膜上(如圖2
6、所示)。模型組中GAP-43紅色熒光信號散在于少數(shù)的細胞膜上且不連續(xù),紅色熒光信號強度呈弱陽性(±)(如圖3所示)。針刺組中GAP-43紅色熒光信號治療第7天連續(xù)性的表達在整個細胞膜上,紅色熒光信號強度增強,雙側(cè)針刺組還可以看到一些GAP-43陽性細胞呈現(xiàn)橢圓并且較飽滿的細胞體,從胞體上發(fā)出一、二根的突起,這是典型的神經(jīng)元細胞形態(tài)(如圖4所示)。而患側(cè)針刺組和健側(cè)針刺組未觀察到典型的神經(jīng)元細胞形態(tài)(如圖8、圖12所示)。治療第14天GA
7、P-43紅色熒光信號強度最強,陽性細胞數(shù)明顯比治療第7天增多,且細胞形態(tài)呈橢圓形且連續(xù)性緊密排列(如圖5、圖9、圖13所示)。治療第21天可見GAP-43紅色熒光信號強度減弱,連續(xù)性表達于細胞膜上,患側(cè)針刺組和健側(cè)針刺組典型的神經(jīng)元細胞消失(如圖10、圖14所示),雙側(cè)針刺組可見散在的典型的神經(jīng)元細胞(如圖6所示)。治療第28天GAP-43紅色熒光信號強度繼續(xù)減弱,信號強度接近假手術(shù)組,只能看到少許信號散在分布于細胞膜上,患側(cè)針刺組和健
8、側(cè)針刺組GAP-43陽性細胞消失(如圖11、圖15所示),雙側(cè)針刺組GAP-43陽性細胞呈星點存在(如圖7所示)。
3.各組實驗大鼠健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)GAP-43免疫陽性細胞數(shù)的相對比值
經(jīng)ANOVA分析,各組實驗大鼠GAP-43免疫陽性細胞數(shù)與細胞總數(shù)比值差異有統(tǒng)計學意義(F=8.8311,P<0.05)。說明各組實驗大鼠健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)GAP-43表達水平有差異。不同治療療程中針刺組GAP-43免疫陽性細胞數(shù)明顯大于假
9、手術(shù)組和模型組,患側(cè)針刺組和健側(cè)針刺組 GAP-43 免疫陽性細胞數(shù)相差不大,雙側(cè)針刺組GAP-43免疫陽性細胞數(shù)最多且明顯多于其他組。
結(jié)論:
1.針刺治療可以促進腦缺血大鼠神經(jīng)功能的恢復。與模型組比較,健側(cè)針刺組、患側(cè)針刺組及雙側(cè)針刺組神經(jīng)功能都有明顯的改善,其中雙側(cè)針刺組治療效果更加顯著。所以雙側(cè)針刺組在大鼠的神經(jīng)功能恢復方面有一定的優(yōu)勢。
2.針刺治療可以促進腦缺血大鼠健側(cè)皮質(zhì)運動區(qū)GAP
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