虎杖苷對大鼠腎缺血再灌注損傷P38MAPK表達(dá)的影響.pdf

1、目的：研究虎杖苷對大鼠腎缺血再灌注損傷P38絲裂原活化蛋白激酶(p38mitogen-activated protein kinase，p38MAPK)及p38mRNA表達(dá)的影響。
　　 方法：將36只清潔雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機(jī)分為6組：I假手術(shù)組；II生理鹽水對照組；III預(yù)處理低劑量組；IV預(yù)處理高劑量組；V缺血后處理低劑量組；VI缺血后處理高劑量組。高劑量組和低劑量組分別予以虎杖苷(polydat

2、in，PD)40 mg/ml及20 mg/ml股靜脈注射。采取右腎切除，左側(cè)腎蒂鉗夾的方法建立損傷模型，夾閉時間為60分鐘，再灌注時間為24小時。用免疫組織化學(xué)方法觀察p38MAPK染色情況；并采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)(real time quantitative polumerasechain reaction，RT-qPCR)檢測p38MAPK mRNA的表達(dá)，用計算機(jī)定量分析。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析，將

3、各處理組數(shù)據(jù)結(jié)果分別與假手術(shù)組及對照組進(jìn)行比較，根據(jù)比較結(jié)果確定是否存在顯著性差異，判定療效。
　　 結(jié)果：
　　 1.各組間P38MAPK表達(dá)的比較(-x±SD)：p<0.05為有顯著性差異；p=0.00(<0.05)，表示P38MAPK比較的結(jié)果有顯著性差異，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.各組P38mRNA表達(dá)的比較結(jié)果(-x±SD)：p<0.05為有顯著性差異；p=0.00(<0.05)，表示P38mRNA比較

4、的結(jié)果有顯著性差異，有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.各組P38mRNA結(jié)果兩兩比較(P值)：
　　 ①對照組與假手術(shù)組相比較，p=0.00(<0.05)，說明二者有顯著性差異，說明對照組P38mRNA表達(dá)明顯升高，提示對照組造成了再灌注損傷。
　　 ②預(yù)處理低劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.43(>0.05)，二者之間沒有顯著性差異，說明預(yù)處理低劑量組的P38mRNA表達(dá)升高不明顯；
　　 預(yù)處理低劑量組與對照

5、組相比較，p=0.01(<0.05)，二者有顯著性差異，說明預(yù)處理低劑量組的P38mRNA表達(dá)升高不明顯，提示預(yù)處理低劑量組減輕了腎缺血再灌注的損傷。
　　 ③預(yù)處理高劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.10(>0.05)，二者之間沒有顯著性差異，說明預(yù)處理高劑量組的P38mRNA表達(dá)升高不明顯；
　　 預(yù)處理低劑量組與對照組相比較，p=0.04(<0.05)，二者有顯著性差異，說明預(yù)處理高劑量組的P38mRNA表達(dá)升高不明

6、顯，提示預(yù)處理高劑量組減輕了腎缺血再灌注的損傷；預(yù)處理高劑量組與預(yù)處理低劑量組相比較，p=0.38(>0.05)，說明二者降低P38mRNA表達(dá)的作用不存在劑量上的差異，提示二者減輕損傷的作用不存在劑量上的差異。
　　 ④缺血后處理低劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.00(<0.05)，說明二者之間沒有顯著性差異，提示缺血后處理低劑量組造成了缺血再灌注損傷，同時，缺血后處理低劑量組與對照組相比較，p=0.60(>0.05)，說明缺

7、血后處理低劑量組P38mRNA表達(dá)明顯升高，提示缺血后處理低劑量組不能減輕缺血再灌注損傷程度；
　　 ⑤缺血后處理高劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.01(<0.05)，說明二者之間沒有顯著性差異，提示缺血后處理低劑量組造成了缺血再灌注損傷，提示缺血后處理高劑量組不能減輕損傷程度。
　　 4.腎組織病理評分(-x±SD)：p<0.05為有顯著性差異；p=0.00(<0.05)，說明各組腎組織病理評分具有組間顯著性差異。

8、r>　　 5.各組腎組織病理評分兩兩比較(p值)：
　　 ①對照組與假手術(shù)組相比較，p=0.00(<0.05)，說明二者有顯著性差異，說明對照組造成了腎組織損傷。
　　 ②預(yù)處理低劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.06(>0.05)，說明預(yù)處理組沒有造成明顯的腎組織損傷；
　　 預(yù)處理低劑量組與對照組相比較，p=0.00(<0.05)，二者有顯著性差異，說明預(yù)處理低劑量組明顯減輕了腎組織損傷程度。
　　

9、③預(yù)處理高劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.07(>0.05)，二者之間沒有顯著性差異，說明預(yù)處理高劑量組造成的損傷不明顯；
　　 預(yù)處理低劑量組與對照組相比較，p=0.00(<0.05)，二者有顯著性差異，說明預(yù)處理高劑量組明顯減輕了損傷程度；
　　 預(yù)處理高劑量組與預(yù)處理低劑量組相比較，p=0.95(>0.05)，說明二者減輕腎組織損傷的作用不存在劑量上的差異。
　　 ④缺血后處理低劑量組與假手術(shù)組相比較，p=

10、0.00(<0.05)，說明二者之間沒有顯著性差異，提示缺血后處理低劑量組造成了腎組織損傷；
　　 ⑤缺血后處理高劑量組與假手術(shù)組相比較，p=0.00(<0.05)，說明二者之間沒有顯著性差異，提示缺血后處理低劑量組造成了明顯腎組織損傷。
　　 結(jié)論：
　　 1.正常腎組織P38MAPK不表達(dá)或僅有少量表達(dá)，對照組P38MAPK表達(dá)較假手術(shù)組明顯升高，說明缺血再灌注導(dǎo)致腎組織中P38MAPK活化；預(yù)處理低劑量組及

11、預(yù)處理高劑量組均能明顯抑制腎缺血再灌注損傷引起的P38MAPK過度表達(dá)，而且，二者之間不存在明顯的量效差異。缺血后處理低劑量組及缺血后處理高劑量組均不能下調(diào)P38MAPK的表達(dá)。
　　 2.正常腎組織P38mRNA不表達(dá)或僅有少量表達(dá)，對照組P38mRNA表達(dá)較假手術(shù)組明顯升高，說明缺血再灌注導(dǎo)致P38mRNA表達(dá)活化，預(yù)處理低劑量組及預(yù)處理高劑量組均能明顯抑制腎缺血再灌注損傷引起的P38mRNA過度表達(dá)，而且，二者之間不存在明