復(fù)原益腎湯對類風濕關(guān)節(jié)炎大鼠TNF-α、IL-17及MMP3的影響.pdf

1、目的:
　　探討IL-17、MMP3在類風濕關(guān)節(jié)炎(RA)的發(fā)病機制，并觀察中藥復(fù)原益腎湯（R&B）及聯(lián)用甲氨蝶呤(MTX)對RA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織病理改變及相關(guān)細胞因子表達的作用，探討復(fù)原益腎湯治療RA的潛在機制。
　　方法:
　　以(Ⅱ)膠原結(jié)合寒濕因素誘導大鼠RA模型，設(shè)正常對照組、模型組、MTX組、復(fù)原益腎湯高中低各劑量組、聯(lián)用組（復(fù)原益腎湯高劑量組聯(lián)用甲氨蝶呤組），分別在4周、8周、12周測算大鼠足腫脹率;酶聯(lián)

2、免疫吸附試驗法(ELISA)檢測血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細胞介素-17(IL-17)水平;免疫組化法(IHC)檢測膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)水平;12周后光鏡下觀察大鼠膝關(guān)節(jié)滑膜組織病理學變化。
　　結(jié)果:
　　模型組大鼠足紅腫明顯，行動遲緩，各關(guān)節(jié)炎癥積分、血清中TNF-α、IL-17和膝關(guān)節(jié)軟骨層及滑膜層MMP3水平均明顯升高(P＜0.05)，隨時間延長升高更明顯(P＜0.01)，三者之間呈

3、正相關(guān)關(guān)系。與模型組比較:用藥4w后，MTX組、中藥高中劑量組及聯(lián)用組血清中TNF-α水平有明顯下降(P＜0.05); MTX組、聯(lián)用組血清中IL-17水平有明顯下降(P＜0.05);各組膝關(guān)節(jié)軟骨及滑膜層MMP3水平無明顯變化(P＞0.05)。用藥8w后，MTX組、中藥高中劑量組及聯(lián)用組血清中TNF-α水平有顯著下降(P＜0.01);MTX組、中藥高劑量組及聯(lián)用組血清中IL-17水平有顯著下降(P＜0.01); MTX組、中藥高劑量組

4、及聯(lián)用組膝關(guān)節(jié)軟骨及滑膜層MMP3水平有明顯下降(P＜0.05)。用藥12w后，用藥各組血清中TNF-α水平有顯著下降(P＜0.01); MTX組、中藥高劑量組及聯(lián)用組血清中IL-17水平、膝關(guān)節(jié)軟骨及滑膜層MMP3水平均有顯著下降(P＜0.01)。其中，中藥高劑量組與MTX組作用相當，無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，聯(lián)用組作用明顯優(yōu)于兩組，有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。中藥高劑量組及聯(lián)用組能明顯改善RA大鼠關(guān)節(jié)滑膜組織病理學形態(tài)，促使滑

5、膜炎癥吸收，減輕滑膜增生和改善軟骨與骨的破壞，聯(lián)用組與正常組接近。
　　結(jié)論:
　　(1) TNF-α、IL-17、MMP3三者呈正相關(guān)關(guān)系，證實IL-17、MMP3是RA關(guān)節(jié)損傷的主要介質(zhì)之一，在RA的發(fā)病機制中起著重要作用。
　　(2)中藥復(fù)原益腎湯可明顯改善CIA關(guān)節(jié)炎大鼠的關(guān)節(jié)炎癥，大劑量和甲氨蝶呤作用相當，其作用機制可能與抑制TNF-α、IL-17、MMP3等炎癥介質(zhì)的釋放密切相關(guān)，且隨治療時間的延長作用更明