當(dāng)歸多糖對(duì)大鼠肝性腦病的預(yù)防作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：我國(guó)是肝病患者人數(shù)眾多的國(guó)家，許多慢性肝病患者最終發(fā)展到肝硬化，并發(fā)肝性腦病(hepatic encephalopathy，HE)，生存率低，預(yù)后差，嚴(yán)重影響人的壽命和生存質(zhì)量，而目前尚沒(méi)有一種治療肝硬化和HE的特效藥物，對(duì)HE的病理生理機(jī)制和治療藥物的研究還在不斷探索中。目前的普遍觀點(diǎn)認(rèn)為高血氨在HE的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。氨通過(guò)血腦屏障擴(kuò)散入腦內(nèi)，在谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase，GS)催化下，由三磷

2、酸腺苷供能與谷氨酸在星形膠質(zhì)細(xì)胞中合成谷氨酰胺。星形膠質(zhì)細(xì)胞是腦內(nèi)唯一有GS的細(xì)胞，代表了腦內(nèi)主要的氨解毒部位，又是攝取興奮性氨基酸谷氨酸的主要部位。在氨濃度增高時(shí)，星形膠質(zhì)細(xì)胞腫脹，對(duì)神經(jīng)元的營(yíng)養(yǎng)支持減少，興奮性氨基酸谷氨酸攝取減少，持續(xù)刺激神經(jīng)元。同時(shí)星形膠質(zhì)細(xì)胞將氨與谷氨酸合成谷氨酰胺而解毒的作用也減弱，腦內(nèi)氨濃度增加，由此形成惡性循環(huán)，打破這種循環(huán)可能是治療HE和改善HE癥狀的一個(gè)途徑。 當(dāng)歸多糖(Angelica Si

3、nensis Polysacchride，ASP)是我國(guó)傳統(tǒng)中藥當(dāng)歸中主要的水溶性成分，具有多種功效。ASP從當(dāng)歸中提取，不管是總多糖還是其多糖各組分，都對(duì)肝臟損傷有治療作用。ASP可以干預(yù)小鼠的急性酒精性肝損傷，增加肝能量?jī)?chǔ)備和對(duì)抗脂質(zhì)過(guò)氧化。ASP還對(duì)小鼠四氯化碳性肝損傷有良好的保護(hù)作用，可降低血谷草轉(zhuǎn)氨酶和肝臟谷胱甘肽s-轉(zhuǎn)移酶活性。因此本研究推測(cè)ASP對(duì)慢性四氯化碳中毒形成的肝硬化和HE可能有一定的治療作用。本實(shí)驗(yàn)的目的即為研究

4、從當(dāng)歸中提取的ASP，對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)產(chǎn)生的肝硬化大鼠的作用，是否可以延緩HE的發(fā)生，及其可能的機(jī)制，為肝硬化HE的治療尋找一種新的途徑。 方法： 第一部分：用微波輔助水提醇沉法從當(dāng)歸中提取ASP，用苯酚-硫酸法測(cè)定其中的總糖含量。 第二部分：S-Dawley大鼠，分為正常對(duì)照組和誘導(dǎo)組。誘導(dǎo)組用40％的四氯化碳溶液做皮下注射。63天后內(nèi)毒素3mg/kg腹腔注射，觀察各組大鼠肝臟病理情況和大鼠腦電圖(electro

5、encephalogram，EEG)的特征有何差別。 第三部分：S-Dawley大鼠，分為正常組、陰性組、陽(yáng)性藥物組、ASP10g/L組、ASP20g/L組、ASP40g/L組，除正常組外，其余均為肝硬化造模成功的大鼠。各組分別給與蒸餾水、蒸餾水、乳果糖、ASP10g/L液、ASP20g/L液、ASP40g/L液灌胃2周后，內(nèi)毒素3mg/kg腹腔注射，記錄昏迷發(fā)生時(shí)間，測(cè)定各組大鼠的血氨、谷丙轉(zhuǎn)氨酶GPT、谷草轉(zhuǎn)氨酶GOT值，和

6、腦細(xì)胞凋亡數(shù)，星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)和腦組織谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體(glutamate transporter,GLT)和GS含量。 結(jié)果： 第一部分：從當(dāng)歸根中提取出當(dāng)歸多糖，總多糖含量68％。 第二部分：誘導(dǎo)組大鼠肝臟有假小葉形成，肝硬化誘導(dǎo)成功，誘導(dǎo)組大鼠血氨值明顯高于誘導(dǎo)前(P＜0.01)。內(nèi)毒素注射后，誘導(dǎo)組大鼠發(fā)生HE，腦電圖出現(xiàn)特征性曲線。正常組大鼠血氨值與實(shí)驗(yàn)前比較無(wú)顯著性差異，內(nèi)毒素注射后無(wú)昏迷，腦電圖正常。

7、 第三部分：陽(yáng)性藥物乳果糖和ASP各劑量組都可以延緩肝硬化大鼠HE的發(fā)生，降低血氨、GPT、GOT值，減少腦細(xì)胞凋亡，增加星形膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量，增加腦組織GLT和GS的含量，ASP40g/L溶液在延緩HE發(fā)生和降低血氨、GOT值，減少腦細(xì)胞凋亡，增加星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)和GLT含量上和乳果糖比較有顯著性差異(P＜0.05)。 結(jié)論：當(dāng)歸多糖對(duì)四氯化碳造成的肝硬化有作用，可延緩HE的發(fā)生，其機(jī)制可能是改善肝功能，降低血氨、GPT、GO