莪術(shù)油抑制宮頸癌血管生成以及VEGF信號(hào)通路相關(guān)因子的研究.pdf

1、目的: 通過(guò)建立人宮頸癌Hela細(xì)胞荷瘤裸鼠模型,探討莪術(shù)揮發(fā)油對(duì)人宮頸癌裸鼠移植瘤的治療作用及可能作用機(jī)制。
　　方法: 1.建立人宮頸癌Hela細(xì)胞荷瘤裸鼠模型,采用腋部外上方皮下接種0.2mlHela細(xì)胞懸液,以建立宮頸癌裸鼠模型。將裸鼠隨機(jī)分為莪術(shù)油高劑量組（32mg/kg）、莪術(shù)油中劑量組(16mg/kg)、莪術(shù)油低劑量組（8mg/kg）、陽(yáng)性藥對(duì)照組（5-Fu）、模型組（生理鹽水）及正常對(duì)照組,隔日1次腹腔注射給藥,連

2、續(xù)給藥10次,給藥周期20天。停藥后24h脫頸處死裸鼠剝?nèi)∧[瘤標(biāo)本檢測(cè)瘤重、瘤體積,計(jì)算抑瘤率；采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)各組腫瘤組織中微血管密度（MVD）計(jì)數(shù)以及VEGFR-2、VEGF-C、HIF-1α、IFN-γ的蛋白表達(dá)。2.通過(guò)MTT法篩選出莪術(shù)油對(duì)人宮頸癌hela細(xì)胞的高劑量組、中劑量組和低劑量組,采用RT-PCR法,檢測(cè)在不同劑量組下VEGF-C和VEGFR-2的mRNA。采用Western blot法,檢測(cè)在不同劑量組下b

3、FGF、p53、COX-2的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果: 1.成功建立人宮頸癌裸鼠模型,成瘤率為100％。2.莪術(shù)油高、中、低劑量組瘤重與模型組比較明顯減輕（P＜0.05,P＜0.01）；高、中劑量組瘤體積較模型組明顯縮?。≒＜0.01）,莪術(shù)油高、中、低劑量組抑瘤率分別為56.65%、33.32%、18.56%。3.免疫組化顯示:莪術(shù)油高、中、低劑量組MVD較模型組降低（P＜0.05,P＜0.01）；莪術(shù)油高、中劑量組VEGF-C表達(dá)

4、較模型組顯著降低（P＜0.01）；莪術(shù)油高、中、低劑量組VEGFR-2表達(dá)較模型組降低（P＜0.01）；莪術(shù)油高、中、低劑量組HIF-1α表達(dá)較模型組顯著降低（P＜0.01）,莪術(shù)油高、中劑量組IFN-γ表達(dá)較模型組增高（P＜0.05,P＜0.01）。3.Western blot結(jié)果顯示:莪術(shù)油高、中、低劑量組p53表達(dá)較對(duì)照組顯著增高（P＜0.01）；莪術(shù)油高劑量組bFGF表達(dá)較對(duì)照組顯著降低（P＜0.01）；莪術(shù)油高、中、低劑量組c

5、ox-2表達(dá)較對(duì)照組增加（P＜0.05,P＜0.01）。4.RT-PCR結(jié)果顯示:莪術(shù)油高、中劑量組VEGF-CmRNA較對(duì)照組顯著降低（P＜0.01）；莪術(shù)油高、中、低劑量組VEGFR-2mRNA較對(duì)照組顯著增加（P＜0.01）。
　　結(jié)論: 1.莪術(shù)油對(duì)裸鼠荷瘤生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用。2.莪術(shù)油能抑制宮頸癌hela的增殖。3.其可能機(jī)制是:莪術(shù)油降低上游HIF-1α、p53的表達(dá),還可降低bGFG的表達(dá)以及上調(diào)IFN-γ的表達(dá)