血栓微顆粒誘導(dǎo)大鼠冠狀動脈微血栓形成的機(jī)制及意義.pdf

1、目的：建立血栓微顆粒誘導(dǎo)大鼠冠狀動脈微血栓形成的動物模型；探討血栓微顆粒誘導(dǎo)大鼠心臟心內(nèi)膜下微血管內(nèi)血栓形成的機(jī)制；評價(jià)冠狀動脈微血栓形成對大鼠心功能的影響。 方法：大鼠隨機(jī)分為冠狀動脈微血栓組(模型組)、假手術(shù)組和正常對照組。鉗夾升主動脈后自主動脈根部注入自身血栓微顆?；蛏睇}水0.2ml/只。取術(shù)后存活大鼠隨機(jī)分為6組，每組6只。分別于術(shù)后1h、1d、1w、2w、3w和4w取標(biāo)本；每只大鼠處死前應(yīng)用高頻數(shù)字超聲心動圖儀評價(jià)其

2、心功能的進(jìn)行性改變；HE染色觀察心內(nèi)膜下微血管內(nèi)血栓形成情況并計(jì)數(shù)有血栓形成的微血管數(shù)量；酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA法)檢測血清中血管性假血友病因子(VonWillebrand因子，vWF)含量；RT-PCR半定量檢測心臟組織中fgl2凝血酶原酶基因的表達(dá)水平。 結(jié)果：①HE染色結(jié)果顯示，模型組大鼠心肌心內(nèi)膜下微血管內(nèi)有血栓形成，部分血栓與內(nèi)膜緊密粘連。模型組中有血栓形成的微血管數(shù)量明顯多于假手術(shù)組(23.06％±1.

3、73％vs5.72％±2.02％，P＜0.01)，而假手術(shù)組和正常對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(5.72％±2.02％vs2.15％±1.01％，P＞0.05)。②大鼠血清中血管性假血友病因子(VonWillebrand因子，vWF)含量在注入血栓微顆粒后1h達(dá)到最高，1d后含量稍下降，但仍顯著高于正常對照和其它各組(P均＜0.05)。其心臟組織中fgl2凝血酶原酶mRNA的表達(dá)水平也在注入血栓微顆粒后1h達(dá)最高，至術(shù)后4w仍持續(xù)表達(dá)，且與血

4、清中vWF含量變化高度相關(guān)。③冠狀動脈微血栓形成后1d，與假手術(shù)組和正常對照組比較，F(xiàn)S值降低(45.95％±1.77％vs51.8％±3.25％、57.30％±1.41％，P＜0.05)，EF值降低(82.78％±2.40％vs90.35％±0.21％、91.08％±1.07％，P＜0.05)；冠狀動脈微血栓形成后4w，與形成后1d組、假手術(shù)組和正常對照組比較，LVIDd顯著增加(6.65mm±0.21mmvs5.25mm±0.21m

5、m、5.40mm±0.46mm、4.70mm±0.28mm，P均＜0.05)，F(xiàn)S值顯著降低(31.60％±0.56％vs45.95％±1.77％、51.50％±4.20％、57.30％±1.41％，P均＜0.05)，EF值顯著降低(65.46％±0.48％vs82.78％±2.40％、87.81％±2.45％、91.08％±1.07％，P均＜0.05)。 結(jié)論：1.注入大鼠冠狀動脈微血管內(nèi)的自體血栓微顆粒促發(fā)了心肌局部的原位血

6、小板纖維蛋白性血栓形成，成功建立了大鼠冠狀動脈微血栓模型。2.血栓微顆粒誘導(dǎo)冠狀動脈微血栓形成可能是通過活化大鼠心臟心內(nèi)膜下微血管內(nèi)皮細(xì)胞和fgl2凝血酶原酶的途徑實(shí)現(xiàn)的：推測冠狀動脈微血管內(nèi)皮細(xì)胞活化導(dǎo)致fgl2凝血酶原酶首先在轉(zhuǎn)錄水平上表達(dá)增高，再進(jìn)一步增加凝血酶原酶的合成，以不同于經(jīng)典凝血途徑的方式，直接激活凝血系統(tǒng)，參與大鼠冠狀動脈微血管內(nèi)血栓形成。3.冠狀動脈微血栓形成后，在慢性心肌缺血的過程中發(fā)生了心室重塑，導(dǎo)致大鼠心功能呈